5'-荧光素氨基磷酸酯，FITC标记荧光染料的合成及纯化过程

5'-荧光素氨基磷酸酯是一种常用的功能化荧光染料，基于荧光素（Fluorescein, FITC）结构，通过在分子末端引入氨基磷酸酯官能团，实现对生物大分子如寡核苷酸、蛋白质和多肽的高效荧光标记。该分子具有典型的荧光素光学特性：激发波长约 495 nm，发射波长约 520 nm，发射强度高、光稳定性好，可用于荧光成像、荧光探针构建及分子示踪研究。

从化学结构上看，5'-荧光素氨基磷酸酯由三部分组成：

1. 荧光核心：荧光素基团为 π 共轭体系，提供稳定的绿色荧光发射，是分子信号输出的主体。

2. 氨基磷酸酯官能团：末端氨基磷酸酯为亲核偶联位点，可与羧基、活化酯或其他适配基团形成共价键，实现对核酸或蛋白质的标记。

3. 连接桥：柔性连接桥将荧光核心与氨基磷酸酯隔离，减少电子干扰，保证荧光性能稳定。

合成过程主要包括以下步骤：

1. 荧光素活化：首先通过异硫氰酸酯化或氯化反应，将荧光素的羟基或羧基活化为可与胺基反应的活性中间体，例如 FITC 形式。

2. 氨基磷酸酯偶联：将活化的荧光素与氨基磷酸酯衍生物在碱性或中性有机溶剂中反应，形成稳定的氨基磷酸酯共价连接。该步骤通常在温和条件下进行，以避免荧光团的降解或自聚反应。

3. 反应监控：反应过程中可通过薄层色谱（TLC）或高效液相色谱（HPLC）监控反应进度，确保荧光素完全偶联到氨基磷酸酯分子上。

纯化过程主要包括：

1. 溶剂沉淀与过滤：初步去除未反应的原料和小分子副产物。

2. 高效液相色谱（HPLC）纯化：通过反相 HPLC 分离目标产物，去除同系物及副产物，提高纯度。

3. 溶剂去除与干燥：纯化后产物通过旋转蒸发或冻干方法去除有机溶剂，得到稳定的固体荧光标记物。

4. 结构确认：通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）和紫外-可见吸收光谱（UV-Vis）确认化学结构和纯度，确保产品功能性和可重复性。

产品名称：5'-荧光素氨基磷酸酯

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09