产品名称:Alexa Fluor488 链霉亲和素偶联物的应用场景
1. 结构特性
链霉亲和素核心:四聚体蛋白(分子量约66 kDa),每个亚基含一个生物素结合位点,与生物素结合的解离常数达10⁻¹⁵ M,耐受pH 2-13及高温(80℃),确保高特异性结合。
荧光染料特性:Alexa Fluor488属罗丹明类染料,激发波长495-499 nm,发射波长519-520 nm,量子产率约0.92,光稳定性良好,水溶性良好,适配488 nm激光器,减少背景噪声。
偶联结构:通过NHS酯与链霉亲和素氨基形成稳定酰胺键,或经生物素-亲和素系统间接偶联,保留生物素结合能力与荧光特性,标记率通常为3-5个染料/蛋白,平衡信号强度与活性。
2. 合成工艺
偶联化学:采用EDC/NHS体系活化Alexa Fluor488羧基,在弱碱性(pH 7.0-8.5)、25-37℃下与链霉亲和素氨基反应2-4小时,形成共价键;或通过生物素-亲和素系统先形成链霉亲和素-生物素复合物,再与AF488-生物素偶联。
纯化与优化:透析、凝胶层析或HPLC去除未反应原料,纯度≥95%;通过¹H-NMR、质谱、FTIR验证结构,确保无杂质干扰。
反应控制:溶剂选无水DMF/PBS,摩尔比染料:蛋白=1:1.2-1.5,避免水解或变性;PEG修饰可增强循环稳定性。
3. 应用场景
免疫检测:免疫荧光染色(细胞/组织)、流式细胞术(细胞表面/内部抗原)、Western blot(蛋白检测)、ELISA(信号放大),结合生物素标记抗体实现靶分子可视化。
核酸研究:原位杂交(FISH)中标记生物素化探针,追踪核酸序列;微孔板检测中定量分析生物素化分子。
细胞生物学:细胞标记、追踪、间相互作用研究,如共聚焦显微镜观察细胞器动态。
多模态成像:与Alexa Fluor系列、Cy染料联用实现多色成像,或整合光热/光动力治疗模块。

关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
我们能提供的产品:
磺酸基-肝素-双键丨双键-肝素-磺酸基/磺酸基-Heparin-双键
肝素-NHS丨N-羟基琥珀酰亚胺酯-肝素/Heparin-NHS/活性酯-肝素/Heparin-活性酯NHS
DSPE-PEG-Heparin丨磷脂-聚乙二醇-肝素/Heparin-PEG-DSPE/磷脂-PEG-肝素Heparin
聚(N-异丙基丙烯酰胺) 丨PNIPAM/聚(N-异丙基丙烯酰胺) 温敏性高分子
PEG-b-PPG-b-PEG丨PEG-PPG-PEG/聚乙二醇-聚丙二醇-聚乙二醇/PEG-聚丙二醇-PEG
DSPE-PEG2000-PAsp丨磷脂-聚乙二醇-聚天冬氨酸/PAsp-PEG-DSPE/磷脂PEG聚天冬氨酸PAsp
PAsp-PCL-PEG丨PEG-PCL-PAsp/天冬氨酸-聚己内酯-聚乙二醇/PEG-聚己内酯-PAsp/天冬氨酸-聚己内酯-PEG




齐岳微信公众号
官方微信
库存查询