常用名 5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯
英文名 5-FAM SE
CAS号 92557-80-7
分子量 473.388
密度 1.7±0.1 g/cm3
沸点 778.7±70.0 °C at 760 mmHg
分子式 C25H15NO9
熔点 >300°C (dec.)
闪点 424.7±35.7 °C

5-FAM, SE(5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯)是一种常用的荧光染料,广泛应用于生物医学研究中,尤其是在分子标记、基因检测、蛋白质标记和免疫检测等领域。5-FAM是一种绿色荧光染料,其强烈的荧光性质使其在细胞成像和分子标记中具有重要作用。SE代表的是琥珀酰亚胺酯(Succinimidyl Ester),它可以与含有氨基基团的分子(如蛋白质、抗体或核酸)发生反应,从而实现荧光染料的共价结合。
1. 荧光特性
5-FAM(5-羧基荧光素)是一种绿色荧光染料,具有强烈的发光性质。它的吸收峰位于495nm左右,而发射峰位于517nm附近,这使得它在绿色荧光通道中表现出色,特别适合在多重标记实验中与其他荧光染料结合使用。由于5-FAM具有高荧光效率和良好的稳定性,它常用于流式细胞术、荧光显微镜成像和核酸分析等实验中。
2. 琥珀酰亚胺酯(SE)功能
琥珀酰亚胺酯(Succinimidyl Ester)是一种常用于化学标记的反应性化学基团。SE基团具有亲和力,可以与氨基基团反应,形成共价键。这使得5-FAM, SE可以方便地与含氨基的分子(如蛋白质、抗体、肽类、核酸等)结合,实现在目标分子上的稳定标记。
3. 应用领域
蛋白质标记:5-FAM, SE常用于蛋白质和抗体的标记,通过将其与蛋白质中的氨基基团反应,研究人员可以实现蛋白质的荧光标记,用于后续的荧光检测、免疫检测和蛋白质-蛋白质相互作用研究。
核酸标记:在基因研究中,5-FAM, SE广泛用于DNA和RNA的标记。通过将其与核酸中的氨基(如通过链霉亲和素标记的DNA)反应,5-FAM可以用于实时PCR、核酸杂交和基因表达分析。
流式细胞术:在流式细胞术(FACS)实验中,5-FAM常用于细胞标记,帮助研究人员对细胞进行分选和分析,尤其是在多色流式细胞术中。
免疫检测与诊断:5-FAM, SE可用于免疫荧光染色,特别是在抗体标记和抗原检测中。通过荧光标记,5-FAM帮助研究人员实现高灵敏度的免疫检测,进行靶向分析。
4. 技术优势
高灵敏度:5-FAM作为一种荧光染料,具有非常高的发光效率,因此可以提供强烈的信号,确保低丰度目标分子能够被检测到。
良好的水溶性:由于其结构上的亲水性,5-FAM能够很好地溶解于水溶液中,适合在生物学实验中使用,尤其是在细胞和组织标记中。
广泛的应用性:5-FAM广泛应用于多种生物学技术中,如流式细胞术、实时PCR、免疫组化、ELISA等,具有较高的适应性。
可与其他染料兼容:5-FAM可以与其他荧光染料进行组合,进行多重标记实验,从而扩展其应用范围,特别是在复杂样本中的应用。
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