FITC-Biotin,荧光素异硫氰酸酯-生物素的反应条件
中文名称:荧光素异硫氰酸酯-生物素
英文名称:FITC-Biotin (Fluorescein Isothiocyanate-Biotin Conjugate)
反应条件:
FITC-Biotin 是一种通过化学共价偶联形成的荧光标记分子,结合了生物素(Biotin)与荧光染料荧光素异硫氰酸酯(FITC)的特性。其制备主要基于 FITC 的异硫氰酸基团(-N=C=S)与生物素的氨基或其他活性基团发生亲核加成反应,生成稳定的巯基或氨基衍生物,从而形成荧光标记的生物素分子。
溶剂选择
FITC-Biotin 偶联反应通常在有机或混合溶剂体系中进行,以保证 FITC 和生物素均可溶解。常用溶剂包括二甲基亚砜(DMSO)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或缓冲水溶液(如碳酸盐缓冲液,pH 8.0–9.0)。溶剂需干燥并去除杂质,以避免反应副产物的生成。pH 条件
反应通常在弱碱性条件下进行(pH 8.0–9.0),此时 FITC 的异硫氰酸基团活性最佳,能够与生物素上的氨基或其他亲核基团高效反应。过高或过低的 pH 会影响反应效率或导致 FITC 分解。温度与反应时间
反应一般在室温或轻微低温(20–25℃)下进行,以避免 FITC 分子光漂白或降解。反应时间通常为 2–24 小时,根据反应浓度和溶剂体系调整,以获得理想的偶联产率。摩尔比与浓度
为提高偶联效率,FITC 与生物素通常按摩尔比 1:1–1.5:1 混合。反应浓度需控制在适中范围,过高可能导致 FITC 聚集或生成副产物,过低可能降低偶联效率。纯化与保存
偶联完成后,通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的 FITC 和副产物。纯化后的 FITC-Biotin 可溶于缓冲液或含少量有机溶剂的体系中,储存条件为低温避光,以保持荧光活性和化学稳定性。
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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