您当前所在位置:首页 > 资讯信息 > 试剂课堂
Biotin-PSMA,生物素PSMA的合成工艺与质量控制
发布时间:2025-12-31     作者:wyh   分享到:

产品名称:Biotin-PSMA,生物素PSMA的合成工艺与质量控制

一、合成工艺:模块化设计与精准偶联

结构组成与模块化设计

核心模块:由PSMA靶向配体(如谷氨酸-尿素类小分子,特异性结合PSMA活性位点)、连接臂(如PEG链或烷基链,调节亲水性与空间柔性)及生物素(通过强亲和力与链霉亲和素结合)三部分构成。连接臂长度(如PEG12、C6链)需优化,避免空间位阻影响PSMA结合活性或生物素识别能力。

偶联策略:采用“分步偶联”法——先通过NHS酯/EDC/NHS活化生物素羧基或PSMA配体的羧基/胺基,形成活性中间体(如生物素-NHS酯);再与含胺基/羧基的连接臂通过酰胺键共价连接。点击化学(如CuAAC)可实现定向偶联,提升反应特异性。

反应条件控制

环境参数:反应在pH 7.0-8.5的水/有机混合溶剂(如DMSO/PBS)中进行,室温避光,避免NHS酯水解或配体结构破坏。温度需严格控制在4-25℃,高温可能导致PEG链断裂或生物素氧化。

纯化与表征:通过高效液相色谱(HPLC)分离杂质并确认主峰;质谱(MS)验证分子量(如分子式C₄₃H₇₈N₆O₁₉S,分子量约1015.2);核磁共振(NMR)确认结构完整性。纯度需≥95%,末端羧基支持EDC/NHS活化偶联。

二、质量控制:多维度验证与稳定性保障

结构与功能验证

结构确认:通过HPLC、MS、NMR联合验证分子结构,确保生物素、连接臂与PSMA配体的共价连接无误。例如,质谱可检测分子量偏差,NMR可验证官能团化学环境。

功能测试:

亲和性验证:利用表面等离子共振(SPR)或荧光标记链霉亲和素,测定生物素-链霉亲和素结合常数(Kd≈10⁻¹⁵ M)及PSMA配体与靶标的结合动力学参数(如Kd、结合速率常数)。

靶向性验证:通过细胞结合试验(如流式细胞术、共聚焦显微镜)验证PSMA配体对前列腺癌细胞(如LNCaP细胞)的特异性结合能力;ELISA或Western blot确认PSMA蛋白捕获效率。

多模态兼容性:验证荧光标记(如AF488、Cy5)或放射性核素(如⁶⁸Ga)标记后的信号稳定性及成像效果。

稳定性与安全性评估

化学稳定性:在不同pH(4-9)、温度(-20℃至37℃)及光照条件下测试稳定性,避免生物素氧化或PEG链降解。储存需避光干燥,-20℃保存,避免反复冻融。

生物相容性:通过MTT法或细胞活力试验验证对正常细胞(如HEK293)的毒性,确保体内应用安全性。免疫原性测试(如人源化链霉亲和素改造)可降低体内应用风险。

批次一致性:通过HPLC、质谱监控批间差异(如纯度波动<2%),确保实验可重复性。

Biotin-PSMA,生物素PSMA

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


我们能提供的产品:

DSPE-Cy5丨二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-CY5荧光染料/CY5-DSPE/磷脂-CY5/磷脂修饰CY5/荧光基团CY5-磷脂

DSPE-Cy7丨二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-CY7荧光染料/CY7-DSPE/磷脂-CY7/磷脂修饰CY7/荧光基团CY7-磷脂

DSPE-FAM丨二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-羧基荧光素/FAM-DSPE/磷脂-羧基荧光素/磷脂修饰羧基荧光素/FAM-磷脂

DSPE-DBCO丨二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-二苯环辛炔/磷脂-二苯环辛炔/DBCO-DSPE/磷脂偶联二苯环辛炔DBCO


库存查询