CY3.5-NHS，花青素3.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯的标记原理与制备方法-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

CY3.5-NHS，化学命名为花青素3.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯（Cyanine 3.5 N-hydroxysuccinimide ester），是一种基于花青素衍生的远红荧光染料的活性酯标记化合物。CY3.5属于花青素（Cyanine）系列染料中的一种，具有优异的光学特性，包括高荧光量子产率、窄激发与发射峰以及良好的光稳定性。NHS（N-hydroxysuccinimide）活性酯是一类常用的化学活性基团，可以与含氨基的分子形成稳定的酰胺键，从而实现共价标记。通过将NHS基团引入CY3.5分子，形成CY3.5-NHS，科研人员能够将其用于多种含氨基体系的小分子和大分子的荧光标记和检测研究。

化学结构与性质

CY3.5-NHS分子结构由两部分组成：一是CY3.5花青素染料的荧光核心，二是通过羧基与NHS形成的活性酯功能基团。CY3.5的花青素骨架提供了远红光荧光特性，而NHS活性酯赋予其可化学反应的活性位点，使其能够与氨基化合物形成共价键。

CY3.5-NHS在溶液中通常呈红色至紫红色，具有良好的溶解性，可溶于极性有机溶剂如DMSO、DMF以及部分水性缓冲体系。在避光和干燥条件下，其分子结构稳定，光学性能保持持久。CY3.5核心的多共轭体系赋予其强烈的荧光信号，而NHS基团的高活性保证了在标记反应中快速、高效结合目标分子。

光学特性

CY3.5-NHS的光学特性主要由CY3.5染料决定。其激发光峰通常位于550 nm附近，发射光峰约为570–580 nm，属于可见光至近红光区域。相对于传统的Cy3染料，CY3.5的发射峰略偏红，具有更强的穿透力和较低的自发荧光背景，适合在复杂体系中进行高灵敏荧光检测。CY3.5-NHS的荧光信号稳定，量子产率高，使其能够在低浓度下提供清晰、可量化的信号。

标记原理与制备方法

CY3.5-NHS的核心标记原理基于活性酯与氨基反应形成稳定酰胺键。NHS活性酯能够与含初级氨基的化合物（如蛋白质、肽、多胺或修饰小分子）反应，在温和条件下实现高效共价结合。其反应条件温和，不破坏目标分子的化学结构，同时可控性强，能够根据需要调节标记程度。

在制备过程中，CY3.5分子通常先通过羧基化或改性获得活性羧基，再通过NHS活化形成CY3.5-NHS。最终产物经过纯化处理，去除未反应的CY3.5和副产物，即可得到高纯度、稳定的活性酯标记物。