FITC-Casein，FITC-酪蛋白，异硫氰酸荧光素标记酪蛋白的介绍-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

FITC-Casein，即异硫氰酸荧光素（Fluorescein Isothiocyanate, FITC）标记的酪蛋白（Casein），是一种广泛应用于生物化学、分子生物学以及蛋白质研究的荧光标记蛋白。该分子结合了酪蛋白的多功能性和FITC的显著荧光特性，能够为蛋白质结合、酶活性检测、膜蛋白研究及分子相互作用分析提供高灵敏度的可视化工具。

化学结构与特性

FITC-Casein由两部分组成：FITC荧光基团和酪蛋白分子。FITC通过其异硫氰酸（–N=C=S）官能团与酪蛋白的氨基（主要是赖氨酸侧链的ε-氨基）形成稳定的共价硫代脲键。此反应温和且高效，不会显著破坏蛋白质的整体结构或功能。标记后的酪蛋白分子既保留了其天然的蛋白质结构和功能，又具备了荧光检测能力。

酪蛋白本身是一类来源于牛奶的磷蛋白，主要包括αS1-酪蛋白、αS2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白。它具有良好的水溶性、热稳定性和可溶性分子量分布，使其成为理想的载体蛋白或底物蛋白。FITC-标记后的酪蛋白保持了这些物理化学特性，同时获得可通过荧光检测的功能。

FITC作为荧光基团，具有激发波长约490 nm，发射波长约520 nm的特性，亮度高且光稳定性较好，使其在荧光显微镜、流式细胞仪或分光光度计中具有显著优势。标记程度可根据实验需求调整，以平衡荧光信号和蛋白质活性。

作用机理与特性优势

FITC-Casein的核心价值在于它同时具有蛋白质底物功能和可视化荧光信号。其应用机理主要依赖于两个方面：

蛋白质底物特性：酪蛋白本身是多种蛋白酶（如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶等）的底物。在体外实验中，FITC-Casein可作为可溶性蛋白酶底物，通过蛋白酶作用切割酪蛋白链，实现酶活性检测。切割酪蛋白后，FITC标记片段释放到溶液中，可产生荧光信号增强，从而实现荧光定量分析。

荧光可视化特性：FITC标记为酪蛋白提供了直观的荧光信号，可用于定量检测或成像观察。例如，FITC-Casein可在微孔板中作为底物，通过荧光分光光度计测量酶切活性；也可在细胞或生物体系中追踪蛋白质摄取、降解及转运过程。

应用领域

蛋白酶活性检测：FITC-Casein是测定蛋白酶活性的重要工具。实验中，通过荧光释放速率即可定量评估酶活性，适用于体外酶动力学研究、抑制剂筛选以及生物制剂评价。

细胞摄取与代谢研究：FITC-Casein可作为蛋白质内化的示踪分子，用于研究吞噬作用、内体运输及细胞代谢过程。细胞摄取FITC-Casein后，可通过荧光显微镜观察蛋白质在细胞内的分布和降解路径。

膜蛋白和受体相互作用分析：FITC-Casein可作为可标记蛋白底物，用于研究膜受体对蛋白质的结合能力及动力学特性。其荧光信号可在结合实验中直接反映蛋白质-受体相互作用的强弱及特异性。

纳米材料及载体研究：在药物递送及纳米颗粒研究中，FITC-Casein可用于标记载体表面蛋白，实现可视化追踪，帮助解析载体在体内或体外的分布、稳定性及降解特性。

实验使用与注意事项

使用FITC-Casein时，需要注意以下几点：

溶液制备：通常溶于PBS或中性缓冲液中，浓度可根据实验需求调整。pH值应控制在7.0–8.0，以保证蛋白质稳定性和荧光活性。

光敏性保护：FITC对光敏感，操作及存储过程中应避免强光直射，建议使用遮光容器。

温度与稳定性：FITC-Casein在低温（如4℃）条件下保存稳定，可短期在室温下使用。长期储存可冷冻（–20℃）并避免反复冻融。

标记比例：标记密度过高可能影响酪蛋白的底物活性或折叠结构；标记过低则荧光信号弱。实验中需根据具体应用选择合适的标记比例。