产品名称：Annexin V-FITC/PI，膜联蛋白 V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶

Annexin V-FITC/PI 是一套用于细胞凋亡检测的经典荧光探针组合，其作用机制基于细胞凋亡过程中细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）的外翻现象和细胞膜完整性的变化，能够实现对凋亡细胞、坏死细胞和活细胞的精准区分。膜联蛋白 V（Annexin V）是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白，其分子量约为 35-36 kDa，在生理条件下能够高特异性地结合带负电荷的磷脂酰丝氨酸，而在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸主要分布于细胞膜的内侧（细胞质侧），当细胞发生早期凋亡时，细胞膜的磷脂双分子层结构发生重排，磷脂酰丝氨酸外翻至细胞膜外侧，此时 Annexin V 即可与之结合，通过偶联的荧光染料实现对早期凋亡细胞的标记。异硫氰酸荧光素（FITC）作为 Annexin V 的荧光标记物，其激发波长为 494 nm，发射波长为 521 nm，呈现明亮的绿色荧光，便于荧光显微镜观察和流式细胞术检测。

碘化丙啶（PI）是一种核酸染料，其核心特性是无法穿透完整的细胞膜，仅能进入细胞膜破损的细胞如晚期凋亡细胞和坏死细胞，并与细胞内的 DNA 结合，发出红色荧光（激发波长 535 nm，发射波长 617 nm）。基于这两种探针的特性，Annexin V-FITC/PI 双染法能够将细胞群体分为三个亚群：Annexin V-FITC 阴性 / PI 阴性为活细胞，Annexin V-FITC 阳性 / PI 阴性为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC 阳性 / PI 阳性为晚期凋亡细胞或坏死细胞。在实验操作中，需要注意钙离子浓度对 Annexin V 结合活性的影响，通常在染色缓冲液中加入 2-5 mmol/L 的 CaCl₂，以保证 Annexin V 与磷脂酰丝氨酸的高效结合。同时，PI 的使用浓度需严格控制，过高的浓度会导致非特异性染色，影响实验结果判读。该探针组合在药物筛选、肿瘤生物学、免疫生物学等领域应用广泛，例如在抗肿&药物活性评估中，可通过检测药物处理后细胞的凋亡率，判断药物的抗肿&效果。此外，该方法具有操作简便、检测快速、结果准确等优点，是目前细胞凋亡检测的金标准方法之一。

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小编：HLL 2026年1月4日