产品名称:Cholera Toxin Subunit B, CF 633的注意事项与规范
1. 储存与稳定性
储存条件:需在-20℃以下冰冻、干燥、避光保存,避免反复冻融(建议分装未用溶液)。溶解后应立即使用,防止活性下降和荧光淬灭。
光稳定性:CF 633染料虽具光稳定性,但长时间强光直射仍可能导致荧光信号减弱,操作及储存需全程避光。
pH敏感性:在pH 7.0-7.5中性环境下荧光强度最佳,酸性/碱性过强环境(如pH<4或>9)可能降低荧光效率。
2. 操作规范
防护措施:操作时佩戴手套、口罩,避免直接接触皮肤或吸入;使用无菌缓冲液(如PBS)溶解试剂,防止污染。
孵育条件:
细胞表面标记:通常4℃孵育(防止内化),时间30分钟至数小时,需优化浓度(推荐0.5-5 µg/mL,预实验验证)。
内化实验:37℃孵育允许CTB内化,通过荧光显微镜观察动态过程。
洗涤与对照:彻底洗涤去除未结合试剂,减少背景信号;设置未标记对照样本,排除非特异性结合干扰。
成像设置:使用Cy5滤光片组,优化曝光时间;多色标记时,CF 633的远红光特性(激发/发射630/650 nm)可减少与GFP/RFP的光谱重叠。
3. 生物安全与用途限制
科研用途:仅限科研、工业应用,禁止用于人体实验、医疗诊治或食用。
无毒性特性:CTB为霍乱毒素非毒性亚基,不干扰细胞信号通路,但需注意潜在生物危害,避免直接接触。
动物实验:需遵循伦理规范,如神经示踪时通过心脏灌注实现器官三维重构。

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