Biotin-BSA，生物素标记牛血清白蛋白的合成步骤概述

中文名称：生物素标记牛血清白蛋白
常用简称：生物素-BSA

英文名称：Biotinylated Bovine Serum Albumin
缩写：Biotin-BSA

结构与功能说明
Biotin-BSA 是一种通过共价化学方法将生物素（Biotin）分子修饰到牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA）上的功能化蛋白。BSA 为分子量约 66 kDa 的球状蛋白，含有丰富的赖氨酸残基，其 ε-氨基可作为活性位点与生物素活性衍生物（如 NHS-生物素）形成稳定的酰胺键。生物素-BSA 兼具蛋白质的水溶性与生物素的强亲和力，可用于生物检测、免疫分析及分子偶联实验中，常作为固相捕获或标记工具。

合成步骤概述

1. BSA 溶液制备

• 将牛血清白蛋白溶解于缓冲液中（常用 PBS 或碳酸缓冲液），pH 控制在 7.2–8.5，确保蛋白质氨基活性适宜。

• 适当调节浓度（通常 10–20 mg/ml），保证反应均一进行。

1. 生物素活化与加入

• 选择 NHS-生物素或其他可水溶的生物素衍生物作为反应试剂。

• 在缓冲条件下将生物素衍生物缓慢加入 BSA 溶液，保证生物素与蛋白质分子充分混合。

• 反应通常在室温下进行 1–2 小时，避光以防生物素降解。

1. 共价偶联反应

• NHS-生物素的活性酯与 BSA 上赖氨酸的 ε-氨基发生亲核反应，形成稳定的酰胺键，实现生物素的共价偶联。

• 反应中需控制生物素与蛋白质摩尔比，以调节修饰程度，避免过度标记影响蛋白质溶解性或构象。

1. 纯化与去除多余试剂

• 反应完成后，通过透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的生物素和小分子副产物。

• 纯化后的 Biotin-BSA 可溶于缓冲液中，并在 4 ℃避光保存，保持蛋白质活性与生物素功能。

1. 表征与验证

• 可通过紫外/可见光吸收（生物素特征吸收）、SDS-PAGE 或结合链霉亲和素的分析方法验证标记成功。

• 标记程度可通过亲和素-酶联检测或质谱进行定量。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

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