FITC-D-赖氨酸,异硫氰酸荧光素–D-赖氨酸,反应步骤

英文名称（English Name）： Fluorescein isothiocyanate–D-lysine
中文名称（Chinese Name）： 异硫氰酸荧光素–D-赖氨酸

FITC-D-赖氨酸是一种功能化荧光标记分子，由荧光团 FITC（Fluorescein Isothiocyanate）与氨基酸 D-赖氨酸（D-Lysine）通过氨基与异硫氰酸基团的共价偶联形成。该化合物在生物化学研究中常用于蛋白质、细胞及纳米材料标记，利用 FITC 的绿色荧光信号进行追踪和检测。

化学结构特点（Chemical structural features）

1. FITC 荧光团（Fluorescein moiety）

• 二苯并呋喃结构，发射绿色荧光（约 520 nm），信号稳定，适合荧光显微镜或流式细胞分析。

2. D-赖氨酸（D-Lysine）

• 含 α-氨基和 ε-氨基，D 型构型，末端氨基为 FITC 偶联提供活性位点。

• 氨基可与 FITC 异硫氰酸基特异性反应，形成稳定的硫脲键。

3. 偶联特性（Conjugation property）

• FITC 与 D-赖氨酸通过 –NH₂ 与 –N=C=S 反应形成共价硫脲键。

• 保持荧光性质和生物活性，便于后续生物标记和分析。

反应步骤（Reaction steps）

4. 原料准备（Preparation of reactants）

• 将 FITC 溶解于干燥的 DMSO 或 DMF 中，浓度一般 1–5 mg/mL。

• D-赖氨酸溶解于适量缓冲液（如 0.1 M 碳酸氢钠缓冲液，pH 8–9），保证氨基呈未质子化状态，提高亲核性。

5. 偶联反应（Conjugation reaction）

• 将 FITC 溶液缓慢加入 D-赖氨酸溶液中，轻轻搅拌。

• 反应温和，在室温下避光进行 2–4 小时，确保 FITC 异硫氰酸基与 D-赖氨酸氨基充分反应。

• 反应方程式：

  \text{FITC – N=C=S + H_2N–Lys → FITC–NH–C=S–Lys}

  形成稳定的硫脲键。

6. 反应终止与稀释（Quenching and dilution）

• 反应结束后，可加入少量甘氨酸或 Tris 缓冲液终止剩余 FITC 活性，防止非特异性反应。

7. 纯化（Purification）

• 通过透析（MWCO 1–3 kDa）、凝胶渗透色谱或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的 FITC。

• 纯化后获得水溶性、荧光稳定的 FITC-D-赖氨酸粉末或溶液。

8. 表征（Characterization）

• 质谱（MS）：确认偶联成功及分子量。

• 紫外-可见光谱（UV-Vis）：检测 FITC 的特征吸收峰（约 490 nm）。

• 荧光光谱（Fluorescence）：确认绿色荧光发射（约 520 nm）。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

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