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SPA-PEG-SPA,聚乙二醇二琥珀酰亚胺丙酸酯的纯化与表征
发布时间:2026-01-08     作者:wyh   分享到:

产品名称:SPA-PEG-SPA,聚乙二醇二琥珀酰亚胺丙酸酯的纯化与表征

一、高效纯化策略:精准去除杂质

反应后处理与初步纯化

透析/超滤:利用分子量截留膜(如3.5kDa MWCO)去除小分子杂质(如未反应的琥珀酰亚胺丙酸酯单体、催化剂EDC/NHS残留)。

溶剂沉淀法:通过调节溶剂极性(如乙醚沉淀)分离目标产物与副产物(如多聚体),提升粗纯度。

离子交换色谱:利用电荷差异分离带负电的琥珀酰亚胺丙酸酯基团与中性杂质,适用于大规模生产。

色谱法深度纯化

凝胶过滤色谱(GPC):采用Sephadex G-25或Sephacryl S-300柱,以PBS/乙腈为流动相,分离目标分子量(如1k-20k)产物与高分子量聚集体或降解片段,确保分子量分布(PDI≤1.1)。

反相HPLC梯度洗脱(C18柱,乙腈/水+0.1%TFA):纯度需≥95%,通过紫外检测器(260nm)监测琥珀酰亚胺丙酸酯特征吸收,去除残留溶剂(如DMF、DMSO)及副产物。

亲水相互作用色谱(HILIC):适用于极性PEG衍生物的分离,提升对水溶性杂质的去除效率。

二、多维度结构验证:精准确认分子构型

核磁共振(NMR)

¹H NMR:通过PEG链的亚甲基信号(δ 3.5-4.0 ppm,宽峰)验证链长及连接位点;琥珀酰亚胺丙酸酯的亚甲基信号(δ 2.5-2.8 ppm,多重峰)确认活性位点完整性。

¹³C NMR:检测琥珀酰亚胺碳信号(δ 170-175 ppm,羰基碳)、PEG链的C-O-C碳信号(δ 60-75 ppm)及苯环碳信号(如存在),排除副产物(如未偶联的PEG或琥珀酰亚胺)。

COSY/HSQC:通过二维谱图确认质子-碳相关性,验证连接位点准确性。

质谱(MS)

ESI-MS/MALDI-TOF:验证分子量及取代率,确保PEG链分子量与理论值一致,双端琥珀酰亚胺丙酸酯取代率≥95%。

高分辨质谱:精确测定分子式,排除同位素干扰或杂质峰。

红外光谱(FTIR)

检测琥珀酰亚胺羰基特征峰(C=O伸缩振动,1700-1720 cm⁻¹)、PEG链的C-O-C伸缩振动(1100-1150 cm⁻¹)及可能的苯环骨架振动(如存在),确保官能团完整性。

X射线衍射(XRD)(可选):分析晶体结构,确认分子构型及堆积方式,适用于高纯度样品。

SPA-PEG-SPA,聚乙二醇二琥珀酰亚胺丙酸酯

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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