FITC-BSA，异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白的合成及纯化过程

中文名称： 异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白
英文名称： FITC-BSA (Fluorescein Isothiocyanate–Bovine Serum Albumin)

合成及纯化过程：

FITC-BSA 是一种常用的荧光标记蛋白，其由 牛血清白蛋白（BSA） 与 荧光染料 FITC（Fluorescein Isothiocyanate） 通过共价键连接形成。该分子在生物学和材料研究中广泛用于示踪、免疫分析和荧光标记实验。其合成和纯化过程强调化学偶联的温和性和产物结构的完整性。

1. 合成原理与反应机制
   FITC 含有活性异硫氰酸酯基团（–N=C=S），该官能团能够与蛋白质分子中的氨基（主要是赖氨酸残基 ε-NH₂）发生亲核加成反应，生成稳定的硫脲键（–NH–C(S)–NH–）。反应为温和的室温反应，通常在缓冲液条件下进行，以避免蛋白质结构变性。

2. 反应条件

• 溶剂体系：FITC 可溶于少量有机溶剂（如 DMSO 或乙醇），随后缓慢加入蛋白溶液中，以保证均匀分散。

• 缓冲液与 pH：反应通常在碳酸盐缓冲液（pH 8–9）中进行，有利于氨基的亲核活性，同时避免蛋白质变性。

• 温度与时间：室温条件下反应 1–4 小时，轻轻搅拌，确保 FITC 与 BSA 分子充分接触。

1. 纯化过程
   FITC-BSA 合成后，体系中存在未反应的 FITC 及可能的低分子副产物，需要通过纯化去除：

• 透析：利用分子量截留膜（MWCO 10–14 kDa）在去离子水或缓冲液中透析数小时至数天，以去除游离 FITC。

• 凝胶过滤（GFC 或 GPC）：对于高纯度要求，可采用凝胶过滤色谱，将高分子量的 FITC-BSA 与小分子杂质分离。

• 终处理：纯化后的产物可通过冻干获得粉末，便于长期储存，同时在避光条件下保持荧光活性。

1. 结构与性能验证
   纯化完成后，FITC-BSA 的标记效率和结构完整性通常通过以下方法验证：

• 紫外-可见吸收光谱（UV-Vis）：检测 FITC 特征吸收峰及 BSA 蛋白吸收峰，评估偶联效率。

• 荧光光谱：确认荧光活性是否保持，并评估信号强度。

• SDS-PAGE：可检测蛋白分子量变化及偶联均一性。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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