FITC-人纤维蛋白原，FITC-Fibrinogen，合成步骤

中文名称： 异硫氰酸荧光素-人纤维蛋白原
英文名称： FITC-Fibrinogen (Fluorescein Isothiocyanate–Human Fibrinogen)

合成步骤说明：

FITC-Fibrinogen 是一种荧光标记蛋白，由 人纤维蛋白原（Human Fibrinogen, Fg） 与 荧光染料 FITC（Fluorescein Isothiocyanate） 共价偶联形成。纤维蛋白原是血浆中重要的可溶性糖蛋白，参与血液凝固过程。FITC 标记赋予其可视化能力，可用于血管模拟研究、细胞粘附实验及纳米递送体系示踪。其合成步骤主要包括以下几个环节：

1. 蛋白质预处理

• 取高纯度人纤维蛋白原溶解于适宜缓冲液中（如碳酸盐缓冲液，pH 8–9），保持蛋白天然构象，防止聚集。

• 蛋白浓度通常控制在 1–10 mg/mL，确保标记反应中氨基位点充足，便于 FITC 偶联。

• 缓冲体系应无氨基污染，以避免与 FITC 竞争反应。

1. FITC 溶液准备

• FITC 通常溶解于少量极性有机溶剂（如 DMSO）中，避免直接加入水溶液造成低溶解度或局部浓度过高。

• 根据预期标记度，计算 FITC 与纤维蛋白原的摩尔比，通常 FITC 过量，以提高偶联效率，但需平衡蛋白结构完整性。

1. 偶联反应

• 将 FITC 溶液缓慢加入纤维蛋白原溶液中，轻轻搅拌混匀，室温下反应 1–4 小时。

• 反应机理为 FITC 的异硫氰酸酯基团（–N=C=S）与纤维蛋白原赖氨酸残基 ε-氨基形成 稳定的硫脲键（–NH–C(S)–NH–），实现共价连接。

• 温和的反应条件可保持纤维蛋白原的二级和三级结构，避免蛋白变性。

1. 纯化与去除游离 FITC

• 偶联反应完成后，体系中存在游离 FITC 及可能的小分子副产物，需要去除：

• 透析法：利用分子量截留膜（MWCO 100 kDa 以上）透析数小时至一整天，去除游离 FITC；

• 凝胶过滤色谱（GFC）：进一步分离标记蛋白与低分子杂质，提高纯度。

• 纯化后产物可在低温、避光条件下储存，保持荧光活性和蛋白稳定性。

1. 结构与功能验证

• 紫外-可见光谱：检测 FITC 的吸收峰（约 495 nm）与蛋白质吸收峰（约 280 nm）；

• 荧光光谱：确认标记蛋白的荧光发射（约 520–530 nm）；

• 蛋白质活性检测：可评估标记后纤维蛋白原的凝血活性和可溶性，确保功能保留。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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