中文名称:唾液基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)
英文名称:Saliva Genomic DNA Extraction Kit (Magnetic Bead Method)
核心原理
该试剂盒基于超顺磁性微球与核酸的特异性结合特性,通过优化裂解液、结合液及洗涤液的配方,实现唾液样本中基因组DNA的高效分离。磁珠表面包被的硅基或羧基基团在特定pH条件下与DNA形成强结合,而通过调整缓冲液离子强度或温度,可实现DNA的精准释放。例如,海狸生物的BeaverBeads™ Saliva DNA Kit通过裂解液破坏细胞膜,释放DNA后,磁珠在结合液中捕获目标分子,最终通过洗脱液获得高纯度DNA。
操作流程
典型流程包括样本裂解、磁珠结合、洗涤纯化及洗脱回收四步。以400μL唾液样本为例:首先加入裂解液和蛋白酶K,55℃温浴10分钟以裂解细胞;随后添加异丙醇和磁珠,涡旋震荡后静置使磁珠吸附DNA;通过磁力架分离磁珠,依次用洗涤液去除杂质;最后加入洗脱液,65℃加热10分钟释放DNA。东纳生物的试剂盒进一步优化了结合步骤,通过延长室温静置时间提升DNA回收率。
应用场景
提取的DNA可直接用于PCR扩增、酶切分析、基因测序等下游实验。例如,在口腔微生物组研究中,该试剂盒可高效分离唾液中的细菌DNA,支持16S rRNA测序分析;在遗传病筛查中,其提取的DNA片段完整性高,适用于长片段PCR检测。此外,部分试剂盒兼容自动化工作站,可实现96孔板高通量操作,满足大规模临床检测需求。
注意事项
样本质量直接影响提取效果,需避免反复冻融导致DNA降解;磁珠使用前需充分混匀,防止沉淀影响结合效率;洗涤步骤需彻底去除盐离子,否则会抑制后续酶反应;洗脱液体积可根据实验需求调整,但需确保完全覆盖磁珠。例如,Biomiga的96通道预装版试剂盒通过预分装裂解液和磁珠,减少了人工操作误差,提升了批次间稳定性。

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公司简介:
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