中英文：时间分辨稀土荧光微球，Eu-TRF Microspheres

1. 定义与光学特性

时间分辨稀土荧光微球是以聚苯乙烯或二氧化硅为载体，掺杂铕离子（Eu³⁺）的纳米至微米级颗粒。其核心优势在于利用铕离子的长荧光寿命（μs级）与特征红色荧光（613nm），通过时间分辨技术区分短寿命背景荧光（ns级），显著提升检测灵敏度。例如，200nm Eu-TRF微球的荧光寿命可达500μs，是传统荧光染料的100倍以上。

2. 制备方法

Eu-TRF微球的制备通常采用溶胶-凝胶法或乳液聚合法。以溶胶-凝胶法为例，首先将铕配合物（如Eu(TTA)₃Phen）溶解于有机溶剂，与硅源前驱体（如TEOS）混合形成溶胶，经水解缩聚生成掺铕二氧化硅微球。乳液聚合法则通过在聚苯乙烯乳胶颗粒聚合过程中引入铕盐，实现铕离子的原位掺杂。两种方法均可通过控制反应条件（如pH、温度）调节微球粒径（20nm-200μm）与荧光强度。

3. 生物医学应用

Eu-TRF微球在生物检测中表现突出。在时间分辨荧光免疫层析中，其长荧光寿命可消除样本自发荧光干扰，实现低丰度靶标（如心肌标志物、肿瘤标志物）的定量检测，检测限可达pg/mL级。此外，微球表面羧基可偶联抗体或核酸探针，用于流式细胞术中的多色标记或细胞分选。例如，5μm Eu-TRF微球已成功应用于新冠病毒抗体检测，灵敏度较传统荧光微球提升3倍。

4. 储存与使用注意事项

Eu-TRF微球需避光保存于-20℃，避免反复冻融导致荧光淬灭。使用前需超声分散10分钟以确保单分散性。实验表明，200nm Eu-TRF微球在-20℃条件下可稳定保存1年，荧光强度衰减率<10%。在免疫反应中，建议采用时间分辨荧光检测仪（延迟时间>100μs）以充分发挥其低背景优势。

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