6-羧基荧光素二乙酸酯，6-CFDA的详情介绍-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

6-CFDA本身在细胞外环境中不发光，属于非荧光型化合物。当其进入细胞后，细胞内的酯酶会催化去除乙酸酯基团，生成带有羧基的荧光素分子（6-羧基荧光素，6-CF），后者呈强烈绿色荧光（激发波长约为492 nm，发射波长约为517 nm）。这种由非荧光前体到荧光产物的转化机制，使6-CFDA成为研究细胞活性、膜通透性和细胞迁移的理想荧光探针。

6-CFDA具有多种显著特点：其分子量较小，便于快速进入细胞；乙酸酯修饰使其水溶性适中，易于在缓冲体系中操作；生成的荧光产物光稳定性良好，能够在显微镜下长时间成像；绿色荧光信号明亮，背景干扰低，可与其他波段荧光染料组合，实现多通道成像。由于其高灵敏度，6-CFDA常用于流式细胞术、活细胞追踪、内吞作用研究以及荧光素酯化分析。

在应用领域，6-CFDA被广泛用于生物医学、环境检测和微生物学研究。例如，在细胞活性检测中，6-CFDA可用于区分活细胞与死细胞，因酯酶活性仅存在于活细胞内，死亡细胞无法转化为荧光产物。在微生物研究中，它可用于标记细菌或真菌，实现荧光追踪与定量分析。此外，6-CFDA还可用于膜运输研究，通过监测荧光素产物在细胞内的分布和累积，分析细胞膜的渗透性和内吞机制。

实验操作中，6-CFDA通常溶解于DMSO或其他有机溶剂中制备母液，再稀释于适宜的缓冲体系中使用。使用过程中需避免光照，以防荧光素基团自发光降解。染料在细胞内的去乙酸酯反应速度受温度、酯酶活性及pH影响，应根据实验设计优化条件。此外，染料溶液宜新鲜配制，以确保高灵敏度和信号均一性。