5-羧基二乙酰化荧光素琥珀酰亚胺酯，5-CFDA-SE的介绍-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

5-羧基二乙酰化荧光素琥珀酰亚胺酯（5-CFDA-SE）是一种高效的荧光标记前体化合物，广泛应用于细胞追踪、蛋白质标记以及分子探针开发。它是荧光素衍生物家族的重要成员，结合了荧光素明亮的光学特性与NHS活性酯的化学偶联能力，同时通过乙酸酯化改性提高了分子的膜穿透性，适用于活细胞及复杂生物体系的应用。

5-CFDA-SE的化学结构主要由三部分组成：荧光素核心、两个乙酸酯保护基以及末端的琥珀酰亚胺活性酯（NHS-酯）。荧光素核心赋予其优异的光学性质，包括激发波长约为490–495 nm、发射波长约为515–520 nm的明亮绿色荧光。乙酸酯保护基使分子中性且亲脂，从而能够轻松穿透细胞膜进入细胞内部。NHS活性酯则提供了与目标分子氨基共价偶联的功能，使其能够生成稳定的荧光标记产物。

在细胞应用中，5-CFDA-SE表现出独特优势。作为非荧光前体，它可以顺利进入细胞，当细胞内酯酶去除乙酸酯基团后，生成带羧基的荧光素，发出明亮的绿色荧光。这种酯酶依赖性转化使得5-CFDA-SE成为研究细胞活性、细胞追踪和细胞分选的理想工具。其荧光信号强烈，背景干扰低，可实现单细胞水平的高灵敏度检测，广泛用于流式细胞术、荧光显微镜观察以及细胞动力学研究。

5-CFDA-SE不仅适用于活细胞实验，也可用于蛋白质及多肽标记。其末端的NHS活性酯能够与蛋白质、抗体或其他含氨基的生物分子反应，形成稳定的酰胺键。标记后的荧光产物既保留荧光性质，又能够维持蛋白质的结构和功能，为蛋白质定量分析、免疫检测以及生物分子相互作用研究提供了可靠工具。其水溶性适中，既可在缓冲液中操作，又可通过有机溶剂（如DMSO）制备母液，实验灵活性高。

5-CFDA-SE的光学特性优异，具有较高的量子产率和良好的光稳定性，可在长时间显微观察和荧光成像中保持信号强度。同时，其绿色荧光信号可与红色或蓝色荧光染料组合，实现多通道成像，适合多重标记实验。由于其光谱在可见光范围内，检测器选择广泛，实验操作便捷。

实验操作中，5-CFDA-SE一般溶解于DMSO或DMF中制备母液，再稀释于适宜的缓冲体系中进行偶联反应。标记蛋白或肽段时，反应通常在pH 7.5–8.5的缓冲液中进行，以确保氨基高效反应。