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AF594 Wheat Germ Agglutinin，AF594标记小麦胚芽凝集素的高效特异性

发布时间：2026-01-26 作者：wyh 分享到：

产品名称：AF594 Wheat Germ Agglutinin，AF594标记小麦胚芽凝集素的高效特异性

1. 核心特性与荧光优势

荧光性能卓越：

AF594（Alexa Fluor 594）为红色荧光染料，激发波长590 nm，发射波长617 nm，量子产率达0.7-0.9，光稳定性极强（抗光漂白能力优于TRITC/FITC），且在pH 4.0-8.5范围内荧光稳定。其长波长特性减少生物样本自发荧光干扰，与绿色（AF488）、蓝色（DAPI）染料多色成像时光谱重叠极低，适配共聚焦显微镜、流式细胞术等高端成像需求。

WGA的糖结合特异性：

小麦胚芽凝集素（WGA）特异性识别N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和唾液酸残基，这些糖类广泛分布于细胞膜、高尔基体、溶酶体、细胞间连接及病原体（如细菌、真菌）表面。WGA分子含4个糖结合位点，通过氢键和范德华力与糖链结合，空间构象呈局部准对称性，确保高亲和力与特异性。

2. 偶联化学与活性保持

偶联机制：

AF594通过NHS酯活性基团与WGA表面赖氨酸残基的ε-氨基反应，形成稳定酰胺键。反应条件温和（pH 7-8.5，室温/4℃避光），避免蛋白质变性。染料与WGA摩尔比可控（通常1-10:1），通过凝胶过滤或超滤纯化，去除游离染料，确保偶联产物纯度＞95%，同时保留糖结合活性。

结构优化：

荧光染料通过柔性连接臂（如PEG链）与WGA偶联，减少空间位阻对糖结合口袋的干扰。偶联后WGA分子量约43.2 kDa，水溶性良好，支持水性生物实验体系，且光稳定性显著提升，适合长时间动态成像（如神经轴突运输、细胞分裂追踪）。

3. 应用场景与高效性体现

细胞膜与亚细胞结构标记：

快速标记细胞膜轮廓（5-10分钟染色），用于膜流动性、内吞作用、细胞极性研究。

追踪内体形成、溶酶体运输等胞内囊泡动态，或与GFP融合蛋白共定位分析蛋白相互作用。

神经科学与示踪：

WGA可被神经元内吞并沿轴突运输，用于逆行/顺行神经示踪（如脑图谱绘制、投射路径追踪），结合AF594红色荧光，实现高分辨率神经网络可视化。

疾病研究与病原体检测：

监测癌细胞表面糖基化异常（如GlcNAc过表达），用于肿瘤诊断与药物筛选。

标记细菌（如大肠杆菌）、真菌细胞壁，研究病原体-宿主相互作用及感染机制。

多色成像与高通量分析：

与AF488（绿色）、Cy5（远红）等染料组合，实现四色以上成像，清晰分辨细胞核、膜蛋白、胶原蛋白基质等结构。适配流式细胞术，快速分选细胞群体，分析细胞周期、表面糖链表达差异。

AF594 Wheat Germ Agglutinin，AF594标记小麦胚芽凝集素

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