活性氧的测定方法

在生物系统中，游离活性氧量很低，因此测定时需要灵敏的方法如脉冲射解、电子自旋共振等技术，但仪器较昂贵。由线粒体产生的H2O2，存在时间较长，能使DCFH探针的荧光物被氧化成DCF（二氯荧光素双乙酸盐），DCF可被酯酶裂解成二氯荧光素，以二氯荧光素为基础的荧光法，可检测H2O2、O2-和OH-，这种方法较简单，但特异性较低。

活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）是O2，带电子后的产物，包括氧的一电子产物氧负离子O2-、二电子产物过氧化氢（H2O2，）、三电子产物羟基自由基（OH-）、一氧化氮等，半衰期较短，脂溶性。体内活性氧主要是在线粒体电子传递链由Ⅲ状态向状态IV转换中产生，线粒体高O2的环境，使高还原态的呼吸链有电子由呼吸链底物端和氧端漏出，并交给O2，而生成O2-。正常时，约2%的氧参与活性氧的产生；生理条件下，适量的活性氧可促进免疫、修复、存活、生长等。消除活性氧的抗氧化体系分为酶系和非酶系，酶系有超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）等，非酶系主要是还原型谷胱甘肽（GSH）、维生素C/E等。细胞内高水平谷胱甘肽GSH，CAT（H2O2酶）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、超氧化物歧化酶SOD、环孢素、抗凋亡因子Bcl-2，可下调活性氧的产生水平

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