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AF488标记小麦胚芽凝集素，AF488 Wheat Germ Agglutinin的操作与使用规范

发布时间：2026-01-26 作者：wyh 分享到：

产品名称：AF488标记小麦胚芽凝集素，AF488 Wheat Germ Agglutinin的操作与使用规范

一、储存条件与稳定性管理

储存温度：推荐-20℃以下避光、干燥、密封保存，避免反复冻融（建议分装为20-50μL小份）。运输时可短期室温（≤3周），但需避光及低温保温。

稳定性：-20℃下可稳定保存1年；溶解后溶液应分装冷冻，2-8℃短期保存不超过1周。避免与氧化剂、还原剂（如DTT）或高浓度糖类（如GlcNAc、蔗糖）接触，以防荧光淬灭或竞争性抑制。

包装形式：通常为冻干粉或固体粉末，部分产品提供DMSO/DMF/水溶性溶液。

二、溶解与溶液配制

溶解方法：冻干粉需缓慢加入无菌水、PBS（pH 7.0-7.4）或含少量BSA（1%）的缓冲液，避免剧烈振荡。溶解后浓度通常为1-10 mg/mL，具体根据实验需求调整。

有机溶剂兼容性：可溶于DMSO、DMF、乙醇等有机溶剂（浓度≤5% v/v），但需控制比例以避免蛋白质变性。

工作液配制：活细胞实验推荐工作浓度5-10 μg/mL，固定细胞可适当提高至10-20 μg/mL。需现配现用，避免长期室温存放。

三、操作步骤与实验流程

细胞预处理：

活细胞：用HHBS或无血清培养基洗涤2次，去除血清蛋白残留。

固定细胞：4%多聚甲醛固定后，用含1% BSA的PBS封闭30分钟，减少非特异性吸附。

标记反应：

孵育条件：37℃（活细胞）或4℃（减少内吞）下避光孵育10-30分钟。活细胞需控制孵育时间≤30分钟，避免荧光淬灭或细胞损伤。

浓度优化：根据细胞类型（如神经元、上皮细胞）调整浓度，高浓度（>20 μg/mL）可能导致膜损伤。

洗涤与成像：

洗涤：用PBS或HHBS洗涤3次，每次2-3分钟，彻底去除未结合探针。

成像：使用488nm激发光，519-520nm发射光（绿光通道），配合共聚焦显微镜、流式细胞术或多色标记实验。

AF488标记小麦胚芽凝集素，AF488 Wheat Germ Agglutinin

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