DiR-NHS，DiR-活性酯的使用注意事项-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

DiR-NHS，全称为 1,1’-二十八基二苯并吲哚红-N-羟基琥珀酰亚胺酯（DiR-NHS, 1,1’-Dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindotricarbocyanine N-hydroxysuccinimide ester），是一种常用的长波红外荧光染料活性酯，广泛应用于生物成像、细胞追踪、脂质标记及纳米载体研究中。它结合了DiR染料优异的近红外荧光特性和NHS活性酯的高反应性，使其能够与生物大分子的氨基（–NH₂）形成稳定的共价连接，从而实现靶向标记和可视化检测。

结构与特性

DiR染料核心：DiR是一种三氰基染料，具有两个疏水性的十八烷基长链，使其能够嵌入脂质膜或脂质纳米颗粒中。其荧光激发波长约为748 nm，发射波长约为780–800 nm，属于近红外（NIR）区域，具有组织穿透能力强、背景自发荧光低的特点。

NHS活性酯：N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性酯可以高效、选择性地与蛋白质、肽或其他含氨基的分子反应，形成稳定的酰胺键（–CONH–）。通过NHS修饰，DiR能够实现可控的化学共价标记，而不影响染料的荧光性能。

合成与化学修饰

DiR-NHS的制备通常包括将DiR染料的羧基末端通过化学方法活化为NHS酯。具体步骤如下：

羧基活化：DiR分子的末端羧基在EDC（1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺）存在下与NHS反应，生成DiR-NHS活性酯。

纯化与验证：通过高效液相色谱（HPLC）、质谱（MS）或核磁共振（NMR）确认DiR-NHS的结构和纯度，确保标记反应效率和荧光活性。

中文名称：DiR-活性酯

英文名称：DiR-NHS

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

供应：西安齐岳生物科技有限公司

DiR-活性酯

主要性能特点

近红外荧光性能：DiR-NHS发射在NIR区域，可显著减少生物组织自发荧光背景，提高体内和体外成像的信噪比。

脂质亲和性与细胞膜标记：长链脂肪烷基使DiR能够嵌入脂质双层膜，用于脂质体、纳米颗粒或细胞膜的荧光标记。

共价标记能力：NHS活性酯可选择性地与蛋白质或多肽的氨基共价结合，生成稳定的荧光标记分子，用于生物大分子的追踪研究。

水溶性与稳定性：DiR-NHS溶于有机溶剂如DMSO或DMF中，操作方便；在避光条件下，其化学稳定性和荧光稳定性良好。

应用领域

体内和体外成像：DiR-NHS可标记细胞、纳米载体或生物大分子，实现小动物体内长时间荧光追踪。其NIR荧光特性能够穿透组织，提高体内成像的灵敏度。

细胞膜和脂质体标记：利用DiR长链疏水性结构，能够嵌入脂质双层膜，标记活细胞或脂质纳米颗粒，用于研究细胞迁移、药物载体分布及膜动态。

蛋白质和多肽标记：通过NHS酯共价结合氨基，DiR-NHS可用于蛋白质或肽类分子的荧光标记，研究蛋白质在体内分布、结合位点及代谢过程。

纳米药物与靶向输送研究：DiR-NHS可用于追踪纳米载体、脂质体、微粒或其他药物输送系统的体内分布，为药物研发提供可视化依据。

使用注意事项

溶解性：DiR-NHS应溶解于干净的有机溶剂（如DMSO、DMF）中使用，避免水解失活。

避光保存：活性酯和染料对光敏感，应在避光、低温（–20℃）条件下储存。

反应条件：标记蛋白质或细胞时，应控制pH在7.2–8.5，确保NHS酯的反应活性，同时避免蛋白质变性。