产品名称：COOtBu-PEG-Fluoresein，叔丁酯聚乙二醇荧光素的合成路径与工艺优化

结构特征与功能协同

三模块设计：以聚乙二醇（PEG）为连接臂，一端为叔丁酯（COOtBu）保护的羧基（-COOH），另一端缀合荧光素（Fluorescein, FITC），分子量可定制（0.4k-10k Da，PDI≤1.05）。

叔丁酯保护基：在酸性条件（如0.5-5% TFA）下可脱保护释放活性羧基，用于后续偶联反应（如与氨基形成酰胺键），避免非特异性水解。

PEG链：提供亲水性、生物相容性及空间位阻效应，降低免疫原性，延长体内循环时间（半衰期延长2-10倍），减少非特异性吸附。

荧光素：具有高量子产率（吸收峰495 nm，发射峰515-520 nm）、光稳定性强，适用于荧光标记、活体成像、免疫荧光实验及细胞追踪。

合成路径与工艺优化

核心合成步骤：

荧光素活化：通过酯化/酰胺化反应将荧光素与PEG链连接，形成Fluorescein-PEG中间体。

叔丁酯引入：采用EDC/NHS活化羧基，与叔丁醇反应生成叔丁酯保护基。

纯化表征：通过硅胶柱层析、透析或HPLC纯化，采用1H NMR、质谱验证结构，GPC测定分子量分布。

分子量定制：通过调节PEG链长度（如2k、3.4k、5k、10k）平衡标记效率与生物分布，短链提升荧光素暴露度，长链增强隐形效应。

生物相容性与安全性

体外/体内实验：在≤50μM浓度下，对HepG2、MCF-7等细胞无显著毒性（CCK-8试验细胞存活率＞80%）；小鼠模型显示低免疫原性，无急性炎症或器官损伤，血液生化指标正常。

代谢途径：PEG链降解为无毒小分子（乙二醇、CO₂）经肾脏排泄；荧光素通过肝代谢排出，避免长期蓄积。

荧光稳定性：在生理条件下保持稳定，避免淬灭，适用于长时间成像追踪。

关于我们：

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