FITC-ADP 荧光素标记二磷酸腺苷的使用注意事项-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

FITC-ADP 是一种将荧光素异硫氰酸酯（Fluorescein isothiocyanate, FITC）标记在二磷酸腺苷（ADP）分子上的荧光探针。ADP 是生物体内重要的能量代谢中间体，参与 ATP/ADP 循环、蛋白激酶反应以及多种信号转导途径。通过将 FITC 引入 ADP 分子，科学家可以利用其荧光性质实时监测 ADP 相关的生物化学过程，广泛应用于酶学研究、蛋白-核苷酸相互作用研究以及细胞信号转导研究。

1. 分子结构与特点

FITC-ADP 的分子结构由两部分组成：

二磷酸腺苷（ADP）

ADP 分子由腺嘌呤（adenine）、核糖（ribose）和两个磷酸基团组成，是 ATP 的水解产物，也是能量代谢和磷酸化反应中的关键分子。

ADP 具有强烈的生物活性，可与多种酶（如激酶、ATPase、腺苷受体）特异性结合。

荧光素（FITC）

FITC 是常用的绿色荧光染料，激发波长约 495 nm，发射波长约 520 nm，具有高量子产率和良好的光稳定性。

荧光素的异硫氰酸酯（–N=C=S）活性基团可与 ADP 的氨基或羟基发生共价偶联，使 ADP 获得可检测的荧光信号。

通过 FITC 标记，ADP 分子可以被荧光检测仪器追踪，实现在体外或细胞水平上对 ADP 结合与转化的可视化监测。

2. 物理化学性质

溶解性：FITC-ADP 可溶于水和缓冲液（如 PBS），适合生物化学实验和细胞实验使用。

光学性质：激发波长约 495 nm，发射波长约 520 nm，荧光信号明亮且稳定。

稳定性：在避光条件下储存，可保持荧光和化学性质的稳定。避免强光和高温环境，以防荧光淬灭。

生物活性：经过 FITC 标记的 ADP 在大多数情况下仍保持与 ADP 结合蛋白或酶的亲和力，但偶尔会因标记位点不同影响结合效率，因此在使用前需进行生物活性验证。

3. 应用领域

FITC-ADP 主要应用于分子生物学、酶学研究及药物筛选中：

蛋白-核苷酸相互作用研究

FITC-ADP 可用于检测蛋白质对 ADP 的结合能力，如激酶、ATP 酶或腺苷受体等。

利用荧光变化（荧光强度或荧光寿命）监测结合反应，帮助研究蛋白活性、动力学参数和结合位点。

酶学研究

在 ATPase、GTPase、激酶等酶的功能研究中，FITC-ADP 可作为底物或竞争底物，观察酶催化过程中 ADP 的生成和转移。

结合荧光检测技术，可实现高通量酶活性分析，快速筛选酶抑制剂或激动剂。

细胞信号监测

FITC-ADP 可用于实时监测细胞内 ADP 变化，研究细胞能量代谢和信号传导过程。

在某些荧光成像实验中，可观察 ADP 在细胞中的分布及动态变化。

药物筛选与靶向研究

通过 FITC-ADP 与靶蛋白结合的荧光变化，可快速筛选对 ADP 结合蛋白有作用的小分子药物或抑制剂，辅助药物开发。

4. 优势

可视化检测：通过 FITC 的荧光信号，ADP 的结合和转化过程可以直观监测。

高灵敏度：FITC 的高量子产率使检测灵敏度高，可检测低浓度分子。

兼容性强：可与多种荧光检测系统（荧光板读数、流式细胞仪、荧光显微镜）兼容。

生物活性保持：合理标记后，ADP 生物活性大部分保持，便于模拟自然条件下的研究。

5. 使用注意事项

避光操作：FITC 易受光漂白，实验及储存过程中应避光。

pH 影响：FITC 荧光受 pH 影响较大，建议在 pH 7.0–8.0 的缓冲液中使用。

标记验证：不同蛋白或酶体系中，FITC-ADP 的结合效率可能受标记位置影响，应进行活性验证。

储存条件：–20℃ 干燥避光保存，可延长有效期。