产品名称:Hexanoic acid-PEG-Propylamine,己酸-PEG-丙氨偶联蛋白质的合成路径与工艺优化
结构特征与功能设计
双功能模块协同:以聚乙二醇(PEG,分子量0.4k-10k Da,PDI≤1.05)为柔性连接臂,一端为己酸(Hexanoic acid)提供疏水羧基(-COOH),另一端为丙胺(Propylamine)提供亲核氨基(-NH₂),形成“亲水PEG-疏水/亲核双端”的Janus结构。
己酸端:疏水性羧基可与蛋白质表面的氨基(-NH₂)通过酰胺化反应偶联,或通过酯键与羟基(-OH)结合,实现定向标记。
丙胺端:亲核氨基可与蛋白质的羧基(-COOH)或活性酯反应,形成稳定共价键,支持双向偶联策略。
PEG链:提供生物相容性、低免疫原性及空间位阻效应,延长体内循环时间(半衰期延长2-10倍),减少非特异性蛋白吸附。
合成路径与工艺优化
核心合成策略:
PEG活化与偶联:PEG-OH经EDC/NHS活化生成活性酯,或通过甲磺酰氯(MsCl)转化为高反应性甲磺酸酯(PEG-OMs)。
双端功能化:活化后的PEG与己酸(通过酯交换)和丙胺(通过亲核取代)依次反应,形成Hexanoic acid-PEG-Propylamine。
纯化表征:采用硅胶柱层析、透析或HPLC纯化,通过¹H NMR(检测己酸、丙胺及PEG质子信号)、质谱(MS)及GPC(分子量分布)验证结构,纯度≥95%。
分子量定制:通过调节PEG链长度(如2k、5k、10k)平衡水溶性/疏水性,短链提升反应活性,长链增强隐形效应。
生物相容性与安全性
体外/体内实验:在≤50μM浓度下,对HepG2、MCF-7等细胞无显著毒性(CCK-8试验细胞存活率>80%);小鼠模型显示低免疫原性,无急性炎症或器官损伤,血液生化指标正常。
代谢途径:PEG降解为无毒小分子(乙二醇、CO₂)经肾脏排泄;己酸/丙胺通过肝代谢排出,避免长期蓄积。
偶联稳定性:酰胺键在生理条件下稳定,避免非特异性断裂;PEG链减少免疫系统识别,延长偶联蛋白的体内半衰期。

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