FITC-Zymosan A 荧光素FITC-酵母聚糖A的存储与稳定性-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

FITC-Zymosan A，是以酵母细胞壁多糖——Zymosan A 为基础，通过荧光标记剂 FITC（荧光异硫氰酸荧光素，Fluorescein Isothiocyanate）进行修饰而得到的荧光标记生物试剂。Zymosan A 本身来源于酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的细胞壁，主要成分为β-葡聚糖（β-1,3-D-葡聚糖为主），并含有少量甘露糖、蛋白质和脂类等结构成分。通过 FITC 标记后，Zymosan A 具备可直接观察和定量检测的荧光特性，可广泛应用于免疫学、细胞生物学及病原学等研究领域。

一、化学与物理特性
FITC-Zymosan A 的核心为 β-葡聚糖骨架，其表面具有丰富的羟基、羧基和氨基，可与 FITC 的异硫氰酸基团形成稳定的共价键，使其获得荧光特性。FITC 是一种绿色荧光染料，吸收波长约为 495 nm，发射波长约为 519 nm，可在荧光显微镜、流式细胞仪和荧光酶标仪中直接检测。标记后的 Zymosan A 粒径一般保持在 1–5 μm，与天然酵母细胞壁颗粒相似，可模拟天然病原颗粒的吞噬行为。

二、制备与标记原理
FITC-Zymosan A 的制备通常包括以下步骤：首先对 Zymosan A 进行纯化和去蛋白处理，以去除干扰杂质；然后在碱性条件下，将 FITC 溶于适当缓冲液中，与 Zymosan A 表面的氨基或羟基反应；反应完成后，通过洗涤和离心去除未结合的 FITC，即可获得稳定的荧光标记颗粒。标记的效率和荧光强度受 FITC 浓度、反应时间、pH 值及温度影响，因此在实验中需要优化条件，以获得信号强度与颗粒稳定性。

三、生物学功能与应用
FITC-Zymosan A 主要用于模拟真菌感染或免疫激活模型，其生物学功能依托于 Zymosan A 的免疫活性。Zymosan A 可被机体的模式识别受体（PRRs）如 Dectin-1、Toll样受体（TLR2/6）识别，诱导巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞的吞噬、活化及炎症反应。FITC 标记使研究者能够通过荧光技术直观观察颗粒的吞噬过程，量化吞噬率、吞噬能力和细胞内分布。常见应用包括：

吞噬实验：利用流式细胞术或荧光显微镜检测巨噬细胞、中性粒细胞或其他吞噬细胞对 FITC-Zymosan A 的摄取情况，从而研究吞噬能力或免疫调节机制。

细胞激活研究：Zymosan A 可刺激炎症因子如 TNF-α、IL-1β 的产生，通过 FITC-Zymosan A 研究其内部化过程和信号通路。

体外病原模拟：FITC-Zymosan A 可模拟真菌颗粒，评估药物、抗体或小分子对吞噬或炎症反应的调控效果。

共聚焦显微成像：结合细胞器染料或荧光标记蛋白，可观察颗粒在细胞内的分布和溶酶体融合情况。

四、操作注意事项
使用 FITC-Zymosan A 时，需要注意以下事项：首先，颗粒应均匀悬浮，避免沉淀或团聚；其次，FITC 荧光受 pH、光照及氧化影响，应在避光条件下保存，一般使用 PBS 或其他中性缓冲液，4℃ 冷藏避光保存；再次，在流式细胞术或显微观察时，应对未被吞噬的颗粒进行充分洗涤，以减少背景荧光干扰；此外，FITC-Zymosan A 可诱导细胞激活，应根据实验需求调整颗粒剂量和孵育时间，以防止非特异性刺激。

五、存储与稳定性
FITC-Zymosan A 一般以干粉或预悬浮液形式供应。干粉形式需低温干燥保存，避免潮解；悬浮液形式需避光、4℃ 保存，并尽量在短期内使用完毕。标记后的颗粒在适宜条件下可保持稳定荧光数周至数月，但荧光强度可能随时间略有下降，因此实验前建议进行荧光强度校准。