产品名称:AF532 SE,AF532 琥珀酰亚胺酯,Alexa Fluor 532 NHS Ester的偶联特性
一、分子结构与核心光学特性
AF532 属于香豆素 / 多芳香环共轭结构,具有刚性共轭骨架与强负电磺酸基团,整体呈水溶性阴离子荧光染料:
激发波长(λex):约 532 nm(可被 532 nm 固体激光器完美激发)
发射波长(λem):约 554 nm
光谱区域:绿光–黄绿光,与 FITC、AF488、AF594、CY3 等光谱兼容性好,适合多色成像。
高荧光量子产率:亮度显著高于传统 FITC、罗丹明、CY3,信号灵敏度高。
光稳定性良好:抗光漂白能力强,适合长时间激光扫描共聚焦成像、高内涵筛选。
pH 不敏感:在生理 pH(4–10)范围内荧光强度稳定,不受环境酸碱度影响,保证定量准确性。
二、NHS 酯(SE)的偶联特性
AF532 以琥珀酰亚胺酯(NHS) 作为反应活性端,具备典型氨基标记优势:
高选择性:温和条件(pH 7.0–8.0)下与生物分子的伯氨基(赖氨酸侧链、N 端)快速反应,形成稳定酰胺键。
偶联效率高:反应迅速、条件温和、无需催化剂、室温即可完成标记。
适用范围广:可标记抗体、蛋白、酶、多肽、亲和素、脂质体、氨基化纳米粒、玻璃 / 芯片表面等。
后处理简单:通过透析、超滤、凝胶过滤即可轻松去除小分子副产物,获得高纯度标记物。
三、Alexa Fluor 532 的理化与生物应用优势
良好水溶性:磺酸化结构使其在水相缓冲液中完全溶解,无需有机溶剂助溶,避免蛋白变性。
低非特异性吸附:负电性和亲水性强,减少静电结合与疏水结合,背景噪音低、信噪比高。
不易聚集自淬灭:分子间排斥力强,标记高丰度蛋白时不易聚集,荧光效率稳定。
生物相容性高:低毒性、不影响生物分子活性,适合活细胞标记、免疫组化、活体浅层成像。
仪器兼容性强:匹配 532 nm 激光激发,适用于共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光光谱仪、微阵列芯片等主流设备。

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