中文名称:花青素CY5-亲和素
英文名称:CY5-Avidin
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司

CY5-Avidin是一种基于亲和素(Avidin)的荧光标记复合物,它通过与CY5荧光染料的共价连接,使得亲和素具有可被特定光谱激发并发射可检测荧光的特性。亲和素是一种四聚体蛋白,天然来源于鸡蛋白,具有高的生物素结合能力,其结合常数高达10¹⁵ M⁻¹,因此被广泛用于生物分子检测、标记和分离实验。CY5作为一种红色荧光染料,其激发波长约在650 nm,发射波长在670 nm左右,具有高量子产率和较低的背景干扰,非常适合在复杂体系中进行荧光检测。
结构与化学特性
CY5-Avidin由两部分组成:
Avidin核心蛋白:天然四聚体结构,每个单体可结合一个生物素分子,因此整个分子可同时结合四个生物素修饰的分子。亲和素结构稳定,对温度和pH变化具有良好的耐受性,使其在多种实验条件下保持功能性。
CY5染料标记:CY5通过共价键(通常为NHS酯或异硫氰酸酯)连接到亲和素的赖氨酸残基上,形成稳定的荧光标记产物。染料的数量可控,通常每个Avidin四聚体上标记1-4个CY5分子,以保证荧光强度和生物素结合能力兼顾。
CY5-Avidin表现出优异的光稳定性,在光照条件下荧光衰减缓慢,同时其荧光谱宽窄适中,可与其他荧光染料(如FITC、CY3等)进行多重标记实验,避免谱间干扰。此外,CY5-Avidin水溶性良好,可在多种缓冲液体系中保持稳定,无需特殊溶解条件。
功能与应用
CY5-Avidin的核心功能源于亲和素与生物素的强亲和性以及CY5的可检测荧光特性。主要应用方向包括:
荧光标记检测:CY5-Avidin可用于标记生物素化分子,如蛋白、多肽、寡核苷酸等。在荧光显微镜或流式细胞仪中,通过CY5的激发和发射波长进行可视化检测,操作简便且信噪比高。
分子捕获与分离:利用亲和素对生物素的高亲和力,可将生物素化目标分子从复杂体系中特异性捕获,并通过CY5的荧光信号实现实时监测。这在蛋白质组学分析、免疫沉淀实验中应用广泛。
多重标记实验:由于CY5发射在红光区,与FITC、CY3等绿黄光荧光染料互不干扰,因此可在同一实验中实现多靶点同步检测,提高实验信息量。
纳米与材料科学:CY5-Avidin也可用于标记纳米颗粒、支架材料或微载体,通过荧光追踪分布和结合行为,为材料表面改性及功能化研究提供可靠工具。
优势与特点
高灵敏度:CY5荧光强,背景干扰小,能够检测低丰度生物素化分子。
稳定性强:亲和素四聚体结构和CY5染料的光稳定性保证长期实验可靠性。
通用性高:适用于多种实验技术,包括免疫分析、荧光显微镜、流式细胞、凝胶分析和微阵列等。
操作简便:可直接与生物素化试剂结合,无需额外催化或特殊条件。
使用注意事项
在实验操作中,为保持CY5-Avidin的活性和荧光性能,应注意:
避免长时间强光照射,以减少光漂白。
在pH极端条件下可能影响亲和素结构和染料稳定性,应在中性或缓冲体系中使用。
与高浓度还原剂或强氧化剂接触可能导致染料损伤。
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