CY5-LDH 花青素CY5标记乳酸脱氢酶的化学结构与性质-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

CY5-LDH是一种将乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase, LDH）与红色荧光染料CY5偶联形成的标记化合物。乳酸脱氢酶是一种关键代谢酶，参与乳酸和丙酮酸之间的可逆转化，在糖酵解和细胞能量代谢中发挥核心作用。CY5是一种远红光荧光染料，激发波长约为650 nm，发射波长约为670 nm，具有高光稳定性、低背景自发荧光和较强的组织穿透力。通过将CY5与LDH偶联，可实现酶的荧光可视化，使其在体外和体内实验中便于追踪、定位和定量分析，为代谢研究、酶动力学研究及蛋白质相互作用提供重要工具。

化学结构与性质

CY5-LDH的制备通常采用CY5的活性衍生物（如CY5-NHS酯或CY5-Maleimide）与LDH分子上的赖氨酸氨基或半胱氨酸巯基进行共价偶联。偶联后的LDH保持酶的催化活性，同时获得CY5的远红荧光特性。CY5-LDH在水溶液中分散均匀，荧光稳定，可在不同pH和缓冲条件下保持结构完整性。其远红光特性使其在细胞或组织体系中具有良好的可穿透性，适合多通道荧光成像实验。

制备方法

CY5-LDH的制备一般包括以下步骤：

溶解LDH：将乳酸脱氢酶溶解在适宜的缓冲液（如PBS, pH 7.4）中，保证蛋白质稳定性。

荧光偶联：将CY5活性衍生物溶解后缓慢加入LDH溶液中，室温或轻微搅拌条件下反应数小时，以形成共价硫代脲或酰胺键。

纯化：通过透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的CY5及副产物，获得纯净CY5-LDH。

验证：使用荧光光谱、紫外吸收光谱及酶活性检测验证偶联效果和LDH功能保持情况。

应用领域

酶动力学与活性研究
CY5-LDH可以在体外实验中用于乳酸脱氢酶的酶动力学研究。通过荧光信号可追踪酶在反应体系中的分布及底物转化过程，同时结合荧光定量方法可分析酶活性变化。

代谢追踪与定位研究
LDH是细胞糖酵解和乳酸代谢的关键酶。CY5-LDH的荧光标记可用于细胞或组织内LDH分布及动态监测，帮助研究乳酸代谢通路及酶在代谢调控中的空间定位。

蛋白质相互作用分析
CY5-LDH可与其他蛋白或小分子进行相互作用实验，利用荧光信号观察复合物形成和解离，适用于酶-抑制剂筛选或蛋白质复合物研究。