Sulfo-Cy5.5-Mal 磺化Cy5.5马来酰亚胺的制备与使用方法-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

Sulfo-Cy5.5-Mal是一种远红光荧光染料的衍生物，它结合了磺化Cy5.5荧光染料的水溶性特性和马来酰亚胺（Maleimide, Mal）活性基团的蛋白质共价偶联能力。Cy5.5是一种远红光荧光染料，激发波长约为675 nm，发射波长约为695–700 nm，具有高光稳定性、低自发荧光背景和深组织穿透能力。磺化改性增强了染料在水溶液中的溶解性，使其在生物体系中使用更为便利。马来酰亚胺活性基团可与蛋白质、肽链或小分子中的巯基（-SH）反应，形成稳定的共价硫醚键，实现精确的分子标记。Sulfo-Cy5.5-Mal广泛应用于蛋白质标记、荧光成像、体内成像以及多通道生物分析研究。

化学结构与性质

Sulfo-Cy5.5-Mal由三部分组成：

Cy5.5核心染料：提供远红光荧光特性，激发与发射波长远离生物体系自发荧光背景，适合深组织成像。

磺化基团（-SO3H）：增强水溶性，降低非特异性吸附，使染料在水溶液和生物体系中稳定分散。

马来酰亚胺活性基团：可与巯基反应形成稳定的共价键，实现蛋白质、酶或小分子靶向标记。

该化合物水溶性好，可在PBS缓冲液或生物体系中稳定存在，荧光强度高且光稳定性优异，适合长时间观察和多通道联合实验。

制备与使用方法

Sulfo-Cy5.5-Mal的使用主要依赖其马来酰亚胺与巯基反应的特性。制备标记蛋白或小分子通常包括以下步骤：

溶解染料
Sulfo-Cy5.5-Mal可直接溶解于水或PBS缓冲液中，避免使用有机溶剂导致蛋白质变性。

蛋白质准备
待标记的蛋白质或肽链需暴露可反应的巯基，通常通过还原二硫键或使用含巯基的氨基酸衍生物。

偶联反应
将Sulfo-Cy5.5-Mal缓慢加入蛋白质溶液中，室温下轻轻搅拌反应30分钟至2小时，形成稳定的共价硫醚键。

纯化
通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的染料及副产物，获得纯化的荧光标记产物。

验证
使用荧光光谱、紫外-可见光光谱和蛋白质含量测定验证偶联效率及染料的荧光性能。

应用领域

蛋白质和酶标记
Sulfo-Cy5.5-Mal可用于标记含巯基的蛋白质、抗体或酶，通过荧光信号直接观察蛋白质分布、定位及动力学行为，广泛应用于蛋白质相互作用、酶活性研究及靶向分析。

细胞和组织成像
CY5.5远红光信号穿透力强、背景低，适合细胞成像、活体组织成像以及多通道荧光实验。磺化结构提高水溶性，减少非特异性吸附，提高成像清晰度。

药物递送与纳米载体研究
Sulfo-Cy5.5-Mal可与药物载体（如脂质体、纳米颗粒）或靶向分子共价结合，标记药物或载体的体内运输和释放路径，为靶向药物递送系统研究提供可视化手段。