中文名称:荧光素标记胆固醇
英文名称:FITC-Chol
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司

FITC-Chol是一种将胆固醇(Cholesterol, Chol)与荧光素异硫氰酸酯(Fluorescein isothiocyanate, FITC)偶联形成的功能化分子。胆固醇是细胞膜的重要组成成分,对膜流动性、信号传导及脂质代谢具有关键作用。通过与FITC偶联,胆固醇获得荧光标记特性,使其在体外实验和体内研究中能够可视化追踪,为细胞膜动力学、脂质运输以及胆固醇代谢研究提供高灵敏、直观的实验工具。
FITC是一种绿色荧光染料,激发波长约为495 nm,发射波长约为519 nm,具有高荧光量子产率和良好的水溶性。将FITC与胆固醇偶联后,分子既保留胆固醇的亲脂特性,又具备可通过荧光显微镜、流式细胞仪或多通道荧光成像系统检测的特性,使其成为膜生物学和脂质研究的重要工具。
化学结构与性质
FITC-Chol由两部分组成:
胆固醇分子:保持亲脂特性,可嵌入脂质双层膜或脂质载体中,用于模拟天然胆固醇行为。
FITC荧光染料:通过异硫氰酸酯与胆固醇衍生物的氨基或羟基形成稳定的共价键,使分子获得绿色荧光信号。
偶联后的FITC-Chol在极性和非极性溶液中均表现出良好的分散性和稳定性,可用于体外膜体系、脂质体实验及细胞培养体系中。其荧光信号强烈且光稳定性好,适合长时间动态观察和多通道联合实验。
制备方法
FITC-Chol的制备通常包括以下步骤:
胆固醇衍生化
胆固醇可先经过氨基化或羟基活化处理,使其表面具有可与FITC反应的功能性官能团。
FITC偶联反应
将FITC-NHS或FITC异硫氰酸酯溶解后加入胆固醇衍生物溶液中,常在有机溶剂或混合溶液中反应数小时,使FITC通过共价键连接到胆固醇分子上。
纯化
通过硅胶柱色谱、透析或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的FITC及副产物,获得纯净的FITC-Chol。
验证
使用荧光光谱、质谱分析和薄层色谱(TLC)确认偶联成功及分子纯度,同时验证荧光强度和胆固醇的脂质结合特性。
应用领域
膜生物学研究
FITC-Chol可用于研究细胞膜胆固醇分布、脂筏结构及膜流动性,通过荧光显微镜观察胆固醇在膜上的定位和动态行为,为膜生物学研究提供直观工具。
脂质运输与代谢研究
通过FITC信号追踪胆固醇在细胞或组织中的摄取、转运和分布,可分析脂质代谢、胆固醇转运蛋白功能及代谢紊乱机制。
脂质体与纳米载体研究
FITC-Chol可嵌入脂质体或纳米颗粒中,用于药物递送研究和脂质载体性能评估,便于观察载体在体内的分布和靶向能力。
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