点击化学又称“链接化学”或“动态组合化学”，指在通过小单元的拼接，来快速、可靠地完成各种类型分子的化学合成。该反应尤其强调开辟以碳-杂原子键（C-X-C）合成为基础的组合化学新方法，其代表反应为铜催化的叠氮-炔基的环加成反应。点击化学反应有如下优点：

（1）可在细胞内发生，利于原位直接找到**作用靶点；

（2）合成反应快速、副产物对细胞无**；

（3）操作简单、条件温和、对水与氧等环境。

通过有机合成的方式在活性分子上引入炔烃等生物正交基团，在不影响其药理活性的前提下合成得到功能化衍生物，随后将该功能化衍生物与细胞共孵育，使其与靶标蛋白结合，利用点击反应再将叠氮修饰的报告基团（生物素或荧光）连接到探针-靶标蛋白复合物上，进而对靶标进行检测、富集和鉴定（图1）

采用点击化学的方式进行靶点鉴定，通常需要3个步骤，具体包括：

（1）小分子探针的设计与合成，随后将该探针与细胞共孵育后实现与靶蛋白的特定位点发生共价结合；

（2）通过点击化学反应，将已与靶蛋白发生共价结合的分子探针与报告基团相连（图2）；

（3）对所识别的靶标进行纯化、富集和鉴定

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