环氧基修饰载玻片：

糖芯片技术是将糖链作为探针固定到载体上,用于检测糖结合蛋白的一类生物芯片技术。

本实验利用二硫苏糖醇和碘乙酰胺依次处理原样蛋白质后,用胰蛋白酶进行酶切.通过滤膜辅助法利用凝集素从上述酶切产物中提取含有特定糖链结构的糖肽.利用糖肽N-端的氨基与环氧基团的反应,将其共价固定到环氧化修饰的载玻片上,制备糖肽芯片.将Cy3标记的蛋白质样本与糖肽芯片进行孵育,扫描孵育后芯片上的荧光信号值,分析比较糖结合蛋白的变化.本实验确定了制备糖肽芯片的**点样缓冲液是pH9.3的0.1M的Na2C03缓冲液。

来源：[1]张志伟. 糖肽芯片检测糖结合蛋白方法的建立及应用[D]. 西北大学, 2017.

文章涉及材料：

玻璃片基(76mm X 25mmX 1mm)

牛血清白蛋白(BSA)

Cy3

Cy5

凝集素LCA和ConA

环氧基修饰玻片

Cy3标记的BSA

Cy3标记核糖核酸酶B（RNaseB）

甘氨酸

十二烷基磺酸钠(SDS)

溴酚蓝

三羟甲基氨基甲烷(Tris)

丙烯酸胺

N,N-甲叉丙烯酸酯

凝集素包括木菠萝凝集素(Jacalin)

太阳麻凝集素(Crotalaria)

植物血球凝集素P；Phytohaemagglutinin,(PHA)

蜗牛凝集素Helix Pomatia Agglutinin,(HPA)

麦胚凝集素Wheat germ agglutinin,(WGA）

花生凝集素Peanut agglutinin,(PNA）

大豆凝集素Soybean agglutinin,(SBA)

双花扁豆凝集素(DBA）

荆豆凝集素Ulex Europaeus Agglutinin, (UEA-I)

小扁豆凝集素(LCA)

马铃薯凝集素(STL) ）

毛苕子凝集素Vicia villosa lectin (VVL, VVA)

番茄凝集素Lycopersicon Esculentum Agglutinin，LEA

兵豆凝集素Lens Culinaris Agglutinin(LcH)

橙黄网胞盘菌凝集素(AAL)

尾穗苋凝集素(ACL)

伴刀豆凝集素(ConA)

桑橙凝集素

槲寄生凝集素

红腰果E型凝集素(PHA-E)

红腰果L型凝集素(PHA-L)

豌豆凝集素(PSA)

蓖麻凝集素(RCA-I)

西泽接骨木凝集素(SNA)

槲寄生凝集素(VAL)

欧蔓陀罗凝集素(DSA)

喇叭水仙凝集素(NPA/NPl)

尾穗苋凝集素(ACA)

雪花莲凝集素Galanthus Nivalis agglutinin, (GNA)

小编zhn2021.11.24