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高密度环氧基磁珠 | 环氧基磁性微球(1微米)的使用说明书
发布时间:2023-06-21     作者:zhn   分享到:

高密度环氧基磁珠|环氧基磁性微球(1微米)

一、概述

环氧基磁性微球提供永久结合和固定各种含胺基、巯基配体。 珠子表面上的高密度环氧酸基团(Epoxy)可用于配体如蛋白质、肽和核酸的共价偶联。 环氧基磁珠可用于共价偶联胺、巯基或含羟基的配体。含羟基、胺和巯基的配体的偶联分别在pH 11-13、pH> 9和pH 7.5~8.5下反应。不溶于水的配体可在50%有机溶剂(二甲基甲酰胺)中偶联。PuriMag Homo-Epoxy包含短臂和长臂磁珠,都适用于蛋白质和多肽的偶联。。

二、产品特性

1.       PuriMag HomoS-Epxoy短链羧基磁珠

基团密度> 400 umoles Epoxy/g beads

 

2.       PuriMag HomoL-Epoxy长链羧基磁珠

基团密度> 200 μmoles Epoxy/g beads

形态:超顺磁球形

直径:1μm

储存:10 mg/mL ,去离子水中 2~8 °C保存,勿冻结。

常温运输,正确使用保存期一年。

 

三、偶联方案

环氧基磁珠PuriMag Homo-Epoxy有利于小配体与磁珠的结合,包括但不限于单糖、肽和二糖。 它也可用于偶联各种配体,如蛋白A、StrepTactin、枯草杆菌蛋白酶和免疫球蛋白。 如果配体负载量太低,可能会导致非特异性吸附过大;如果配体负载量过高,可能会造成空间位阻。因此,强烈建议优化每个单独应用的磁珠用量。推荐用量一般为0.04~0.4 mg多肽/ mg磁珠。 以下实验方案可相应放大和缩小。

 

A. 缓冲液

1) 偶联缓冲液(Coupling Buffer): 0.1 M sodium carbonate buffer or 0.1 M sodium phosphate, pH 8.5-10;

注意:缓冲液的离子强度对于获得更高的偶联效率至关重要。 偶联缓冲液应具有小的离子强度,并且不应含有任何氨基(例如Tris)、硫醇、羟基和酚。但洗涤或储存缓冲液可含有氨基、硫醇、羟基和酚基团。

2) 封闭缓冲液(Blocking Buffer): 1 M ethanolamine, pH 9.0;

3) 洗涤缓冲液(Wash buffer): PBS, pH 7.4.;

 

B. 偶联方法

注意:将环氧基磁珠按10mg/ml悬浮在50%丙酮中,剧烈涡旋分散磁珠并储存在4 ℃。使用前混匀磁珠。

1. 将10mg磁珠转移至EP管中。

2. 将EP管置于磁磁力架上1min,吸弃上清液,用1ml偶联缓冲液重新悬浮磁珠。

3. 重复步骤2三次。

注意:一旦水化,应尽快使用磁珠。

4. 将适量的蛋白质或肽溶解在1ml偶联缓冲液中。

注意:环氧基活化磁珠的偶联效率因配体而异。用户应根据经验优化配体的浓度。推荐1-10 mg/ml用于蛋白质结合;对于小肽,配体浓度应超过200 umol/ml。

5. 将蛋白质溶液加入洗过的磁珠中,重悬磁珠并孵育。

注意:胺类配体如蛋白质在25 ℃下偶联15~48 h。但是,如果配体对温度非常敏感,可在4℃下偶联至少48~72 h。肽、含羟基的配体例如碳水化合物或含巯基的配体在25~75 ℃下偶联4~15 h。

6. 用1ml PBS缓冲液洗磁珠3次。

7. 将0.5~1ml封闭缓冲液添加至磁珠中,并在4℃下孵育至少4h或过夜。

8. 用1ml PBS缓冲液洗磁珠4-6次。

9. 用PBS缓冲液(0.1%叠氮化物)将磁珠重悬至所需浓度,储存于2~8 ℃并避免冻结。

用途:科研

纯度:≥95%

保存时间: 1年

产地:西安

供应商:西安齐岳创科生物科技有限公司

注意事项:仅用于科研不用于人体

 


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