UDP 糖|产气肠杆菌IFO 12010的udp -糖水解酶基因(ushA)的克隆与鉴定
发布时间:2022-01-10     作者:UDP 糖   分享到:
细菌碱性磷酸酶(BAP, phoA基因产物)主要负责底物5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐对甲苯胺(XP)和对硝基苯磷酸盐(pNPP)的水解。利用这些底物和大肠杆菌phoA突变体,
我们克隆了具有XP+表型的产气肠杆菌基因。
根据表型测试和DNA序列确定了两种类型的克隆。
其中一个是拟产氧大肠杆菌phoA基因(XP+, pNPP+);令人惊讶的是,
另一个被发现是ushA基因(XP+, pNPP−),它编码UDP(尿苷5 ' -二磷酸)糖水解酶。
产气杆菌ushA基因与大肠杆菌ushA和鼠伤寒沙门氏菌ushA0基因在核苷酸(超过79%)和氨基酸(超过93%)水平上具有高度的序列同源性。
在大肠杆菌中,产气大肠杆菌ushA基因的表达产生了高水平的udp糖水解酶,
TLC(薄层色谱)分析证实了这一点,同时存在一个强条带,这是由于在聚丙烯酰胺凝胶上的XP水解。
UDP-L-RhaNAc | UDP-4n-D-FucNAc |
UDP-D-XylNAc | UDP-VioNAc |
UDP-2-Biotinyl-GalNAc | UDP-6-Biotinyl-GalNAc |
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