UDP 糖|通过残基取代拓宽黑莓糖基转移酶UGT78H2的糖供体选择性
发布时间:2022-01-13     作者:UDP 糖   分享到:
糖基化次生代谢物在被消耗的植物和相关产品中占很大比例的营养或成分。
糖基修饰在很大程度上取决于植物udp -糖基转移酶(UGTs)的活性。这些反应的底物选择性和特异性的机制仍不清楚。
黑莓果实中UGT基因UGT78H2的克隆及功能鉴定。体外酶底物特异性分析和酶动力学证明UGT78H2糖基酸只使用槲皮素尿苷-5 '二磷酸葡萄糖醛酸(UDP-glucuronic acid,葡萄糖醛酸)和尿苷-5 '二磷酸半乳糖UDP 糖。
位点定向突变引入了两个残基(N340P, K360N),这两个残基以前没有研究过。
该突变提高了蛋白质的催化效率,尤其是对UDP 糖的催化效率(提高了23%),并扩大了糖供体的选择性,也可以利用udp -葡萄糖。
分子模拟和生化分析结果表明,PSPG (plant secondary product glycosyltransferase,植物次生产物糖基转移酶)基序的第23个残基(UGT78H2中的360个)是确定该糖选择光谱的关键残基。
获得了UGT78H2的启动子。利用UGT78H2pro::GUS报告基因系统进行的转基因分析表明,启动子控制的转录本主要在年轻组织中表达。
亚细胞定位研究表明,UGT78H2在细胞核和细胞质中是一种可溶性蛋白。这些结果阐明了UGT78H2的生物学功能,为园艺植物基质选择性修饰特别是糖供体选择性修饰提供了**途径。
UDP-L-RhaNAc | UDP-4n-D-FucNAc |
UDP-D-XylNAc | UDP-VioNAc |
UDP-2-Biotinyl-GalNAc | UDP-6-Biotinyl-GalNAc |
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