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UDP 糖|干酪乳杆菌中同源过表达葡萄糖焦磷酸化酶增强葡萄糖和半乳糖
发布时间:2022-01-18     作者:UDP 糖   分享到:

在糖基转移酶催化下,udp -糖被广泛用作低聚糖合成的底物。

在本研究中,一种旨在将碳通量导向udp -葡萄糖和udp -半乳糖生物合成的代谢工程策略已成功应用于干酪乳杆菌。

在可诱导的nisA启动子控制下,克隆了干酪乳杆菌BL23中udp -葡萄糖焦磷酸化酶(galU)的galU基因,并通过同源过表达验证了该基因的功能。

值得注意的是,GalU活性增加约80倍,导致udp -葡萄糖增加约9倍,udp -半乳糖增加约4倍。

这表明,内源性的udp -半乳糖4-异丙基酶(GalE)活性,即相互转换udp -糖,不足以维持udp -葡萄糖/ udp -半乳糖的比例。

将编码galE的干酪乳杆菌galE基因克隆到galU的下游,并转化到干酪乳杆菌中。

重组菌株的GalE活性增加了4倍,但这一增加并不影响该比例,表明GalE对udp -半乳糖的亲和力高于对udp -葡萄糖的亲和力。

在这里构建的干酪乳杆菌菌株在细胞内积累了高水平的udp -糖,将是足够的宿主生产低聚糖。

UDP-L-RhaNAcUDP-4n-D-FucNAc
UDP-D-XylNAcUDP-VioNAc
UDP-2-Biotinyl-GalNAcUDP-6-Biotinyl-GalNAc


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