UDP糖|UDP-(3-脱氧-3-氟)-d-半乳糖和UDP-(2-脱氧-2-氟)-d-半乳糖的酶法合成及底物活性与UDP-半乳糖-半乳糖变酶有关
发布时间:2022-02-15     作者:UDP糖   分享到:
用酶法制备了新型UDP-糖尿苷5 ' -(3-脱氧-3-氟-d-半乳糖基二磷酸)(1)和UDP-(2-脱氧-2-氟)-d-半乳糖(2),并作为UDP-半乳糖基突变酶(UDP- galp mutase EC 5.4.99.9)的底物类似物进行了测试。
用HPLC和19F NMR观察UDP-Galp突变酶对1和2的转化。
产物的HPLC洗脱图谱和19F化学位移与预测的呋喃糖形式1和2的形成相一致。化合物1和2的Km值与天然底物UDP-Galp相似(1,0.2 mM, UDP-Galp为0.6 mM),但kcat值差异**(1,0.02 mM, UDP-Galp为1.6/min)。
通过1H和19F核磁共振波谱分析,还观察到UDP-Galp突变酶转化过程中生成的产物(UDP-Galp,化合物1或化合物2)的平衡产率与水溶液中游离糖在热平衡时的呋喃糖含量之间存在相关性。讨论了这些结果对这一异常酶促反应机理的影响。
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