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链霉亲和素(SA)的介绍及各荧光染料的激发波长
发布时间:2022-04-02     作者:lh   分享到:

  链霉亲和素(SA)简述:

  链霉亲和素(SA)是Streptomycesavidinii菌的分泌物,其分子量和结合生物素的能力与蛋清中的亲和素相似,等电点6.0,非特异性结合远低于亲和素。

  链霉亲和素(SA)来源:

  SA是Streptomycesaviclrdi菌培养过程中的分泌物,主要通过21亚氨基生物索亲和层析法进行净化。1L培养液含有10~60mg的蛋白质。链霉亲和素是一种大小为66kda的四聚体蛋白质。一分子链霉亲和素可以与四分子生物素高度特异化,两者之间的亲和力**。

  应用链霉亲和素(SA):

  酶免疫测定enzymeimunoassays。

  免疫组织化学,imunohistochemistry。

  流式细胞仪,flowcytometry。

  westernblot,原位杂交。

  imunoblotingprocedures免疫印刷程序。

  westernblot免疫痕迹。

荧光标记物激发波长

  介绍荧光标记链霉亲和素(SA):

  FITC-Streptavidin:

  FITC是一种广泛使用的荧光基团,但其**的缺点是淬灭速度快,使用抗淬灭剂可以减少。

  花青染料:

  Cy3比FITC更稳定,在表面荧光显微镜下,Cy3的荧光FITC更强。Cy3和Cy5比大多数荧光基团更亮、更稳定、背景更弱。两者经常在共聚焦显微实验中标记更多。但Cy5的缺点是不能用表面荧光显微镜观察,所以通常用远红外检测器的共聚焦显微镜观察。

  TRITC-Streptavidin:

  TRITC、RRX、TR:TRITC经常与FITC一起用于双标记实验或TR,但TR会产生更高的背景。RRX在使用含氪氢灯的激光聚焦扫描显微镜作为三标记实验时特别有用,可以和Cy3(或FITC)和Cy5一起使用,因为RRX的发射波长在Cy3和Cy5之间,很少与之重叠。

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