荧光染料的一个基本原理是在荧光剂的帮助下对细胞成分进行高度特异性的可视化。
西安齐岳生物提供酶HRP,荧光FITC,Biotin、Cy3、Cy5、Cy7、罗丹明等荧光物质标记蛋白,标记位置是氨基,标记的蛋白有:牛血红蛋白、胶原蛋白、链霉亲和素、大鼠免疫球蛋白、牛胎球蛋白、人转铁蛋白、胰岛素、重组蛋白G等几十种蛋白,提供检测图谱。
它可以是一种荧光蛋白,例如GFP与基因上感兴趣的蛋白质有关。如果克隆是不可能的,比如在组织样本中使用免疫荧光染色等技术来可视化感兴趣的蛋白质。因此,使用与不同荧光染料连接并直接或间接与适当目标结构结合的抗体。借助荧光染料,荧光显微镜不仅限于蛋白质,还可用于检测核酸、聚糖等结构。你甚至可以使用特定应用的各种活细胞染料,允许细胞器选择性染色(如ER、线粒体、高尔基体)或功能测定。例如,荧光是活细胞跟踪、标记、细胞增殖或活死细胞测定的读取方式。甚至可以检测到钙离子和其他非生物质。
在荧光显示过程中,有两种方法可以显示你感兴趣的蛋白质。荧光标记抗体要么借助内部荧光信号将荧光蛋白与靶蛋白基因连接,要么借助结合目标蛋白特异性的荧光标记抗体。对于一些生物学问题,执行后的问题更有用甚至必要。例如,在组织样本的情况下,不可能使用荧光蛋白,因为样本通常来自不含荧光蛋白的生物体。荧光蛋白的另一个缺点是它们本身就是蛋白质的性质。有了它,它们在细胞中具有特定的蛋白质特征,这可能导致功能障碍或对附着的感兴趣蛋白质的误解。然而,应考虑使用荧光蛋白通常是研究活细胞的**。
免疫荧光利用抗体对抗原的特异性结合亲和力。这可以有两种不同的外观。最简单的方法是使用荧光标记抗体与感兴趣的蛋白质结合。这被称为直接免疫荧光。
在大多数情况下,使用两种形式的抗体。**种与目标蛋白结合,本身没有荧光标记(一种抗体)。但**种抗体(二种抗体)与一种抗结核特异性地携带荧光染料。这种方法被称为间接免疫荧光,有几个优点。一方面,有放大作用,因为不止一种二抗体和一种一抗结核体。另一方面,通常比普通荧光染料标记的特异性一抗体更容易找到二抗体。
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