凝集素的荧光标记（Cyanine染料、荧光素FITC）
凝集素可作为组织化学的特异性探针广泛用于光镜的石蜡切片和冰冻切片、电镜树脂包埋超薄切片及冰冻超薄切片等标本的观察。为使结合在细胞膜上单糖的凝集素呈现可视性。目前已有荧光素异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate，FITC)、辣根过氧化物酶和生物素、铁蛋白、胶体金标记凝集素的组织化学染色。

橙黄网胞盘菌凝集素(AAL)是两个相同亚单位的二聚体,每个亚单位约36kDa。与欧洲乌贼和莲藕四角叶凝集素偏好(α-1,2)连接的岩藻糖残基不同,枳实凝集素优先与岩藻糖连接(α-1,6)到N-乙酰葡萄糖胺或岩藻糖连接(α-1,3)到N-乙酰乳糖胺相关结构结合。AAL还可逆地结合岩藻糖与核酸

荧光素标记的*凝集素具有适当数量的荧光色素,为该凝集素提供*的染色特性。这种共轭物基本上不含未结合的荧光色素。激发峰值为495 nm,发射峰值为515 nm。

FITC标记凝集素的组织化学染色程序

1．组织切片经脱蜡处理，若是Bouin液固定的组织，用70％乙醇洗3次除去组织切片内的黄色后，再用蒸馏水漂洗；

2．PBS漂洗(含1％牛血清白蛋白)2次，每次5分钟；

3．加入FITC-凝集素(PBS适当*释)，置湿盒内孵育，室温1小时；

4．PBS漂洗3次，每次5分钟；

5．水溶性封片剂封片，荧光显微镜观察。

6．结果 FITC标记的凝集素能直接与组织细胞内的糖基结合，从而显示糖基的位置，可用于检测组织细胞中的糖成分，阳性部位呈黄绿色荧光。

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