荧光标记多肽（不同序列号的多肽）

西安齐岳生物提供CY系列菁染料CY3、CY5、CY5.5、CY7、CY7.5，ICG，荧光素FITC，Bodipy系列染料，香豆素及双光子香豆素系列染料，近红外区域IR系列，ICG系列染料，TO噻唑橙系列染料，

一、什么是荧光标记？

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。

二、荧光标记的位点

荧光标记物质可以直接和多肽的N端直接相连（如异硫氰酸荧光素的连接， 通常在多肽的N端和异硫氰酸荧光素直接插一个氨基乙酸或者β-丙氨酸。），或者在C端和赖氨酸（或半胱氨酸）的侧链连接、或者在其它可以连接的位子连接。

三、荧光标记的举例

1. FITC修饰多肽：
  异硫氰酸荧光素（FITC）具有比较高的活性，通常来说，在固相合成过程中引入该种荧光基团相对于其他荧光素要更容易，并且反应过程中不需要加入活化试剂。

FITC修饰的多肽通常主要有两种形式：
（1）在整条肽链N端接入FITC，并且在FITC之前接入一分子的Acp（6-氨基己酸），也称烷基间隔器。反应中FITC与肽链上裸露的-NH2反应，Acp的接入提供了六个碳的直链空间，大大降低了反应的空间位阻，提高了反应效率，降低了反应难度。其次，FITC还与多肽结构中的-SH，侧链-NH2反应，Acp的加入也降低了这种副反应发生的可能。此外，多肽在酸性环境条件下切割时，在N端接入FITC的多肽需要经历环化作用来形成荧光素，这种过程通常都会伴随一个氨基酸的切除，而烷基间隔器Acp的接入就避免了这一情况的发生。

（2）在整条肽中的某个Lys侧链接入FITC，Lys侧链为末端为-NH2的四碳直链烷基，直接起到了降低空间位阻的作用。这种修饰方式能够灵活的在整条肽中任何位置进行FITC修饰，而不仅仅局限于末端。

2. 香豆素AMC修饰

7-氨基-4-甲基香豆素（AMC）是一种荧光标记试剂，例如，酶的痕量测定，酶的鉴定，激光染料的制备等多种用途，此外，C端用香豆素修饰的泛素分子也是研究蛋白质泛素化过程的重要探针。

与其他荧光染料不同的是，AMC修饰多肽分子是从C端进行：（1）AMC与肽链C端的一个氨基酸反应;（2）固相合成整条肽链（从**个氨基酸开始），并且保留整条肽链的侧链保护基和一个氨基保护基；（3）液相缩合AA-AMC与全保护的肽链；（4）切除保护基，完成肽链的修饰。

3. 5-FAM修饰

通常用于激光共聚焦显微镜和流式细胞技术的运用。

4. Rhodamine B（罗丹明 B）修饰

罗丹明B是众多罗丹明染料中的一种，用于荧光测定。

5. 5-TAMRA 修饰

5-TAMRA是用于标记肽和蛋白质的流行的橙色荧光团之一。

6. Cy 3和 Cy 5修饰

Cy3 and Cy5 是高消光系数的染料。因此，它们特别适用于细胞内的多肽定位实验。它们的缺点是在多肽合成的环境中非常的不稳定，因此合成的量相对低。

西安齐岳生物提供用荧光标记

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