西安齐岳生物科技有公司自己的实验室**合成荧光标记的蛋白,糖,氨基酸,高分子等产品,我们可以提供的荧光染料包括有以下不同波段的荧光染料产品,荧光染料包括以下荧光染料FITC/Rhodamine/TRITC/Comarin/Bodipy/ICG/CY3/CY3.5/CY5/CY5.5/CY7/CY7.5等等。
西安齐岳提供CY系列菁染料CY3、CY5、CY5.5、CY7、CY7.5,ICG,荧光素FITC,Bodipy系列染料,香豆素及双光子香豆素系列染料,TRITC/Comarin/Bodipy,近红外区域IR系列,ICG系列染料标记。
异硫氰酸荧光素(FITC)标记
异硫氰酸荧光素(FITC)具有标记生物分子的检测性能,可用于检测或跟踪共轭物与其他生物分子的相互作用。FITC是荧光素的异硫氰酸酯衍生物,主要通过对其5-碳位下环的改性合成。FITC的异硫氰酸酯能与蛋白质或抗体的伯胺基发生反应,这种性质可用于标记。FITC的荧光特性包括在495nm处的吸光度和520nm的发射波长。
琥珀酰化钥孔傶血兰蛋白本制品为钥孔傶血兰蛋白冻干粉,蛋白含量≥85%(双缩脲法),铜含量0.10-0.20%,CAS号:9013-72-3。
钥孔傶血兰蛋白(Keyhole Limpet Hemocyanin,KLH)为海洋生物蛋白,由Limulus Polyphemus Hemolymph中分离提取,在抗体和免疫血清制备中,常被用作载体蛋白与半抗原偶联用于完全抗原的制备。
提供一种 FITC标记蛋白的使用方法
1.制备溶于0.1M碳酸钠缓冲液( pH 9.0 )的待标记蛋白溶液,浓度≥2mg/ml.
2 )溶解FITC于无水DMSO配制成1mg/ml的溶液。
3 )对于1ml蛋白溶液加入50μFITC溶液,可按照每次5μ的量边加边轻轻搅拌蛋白溶液;
4 )待所需FITC加入完毕,将反应液于4°C避光孵育8h ;
5 )加入NH4CI使其终浓度50mM , 4°C终止反应2h ;
6)加入二甲苯青浓度0.1% ,甘油浓度5% ;
7 )通过大小孔径合适的凝胶过滤层析分离排除未被结合的FITC ,分离范围在20,000-50,000 (球蛋白例如抗体)。待凝胶柱平衡后,将以上反应混合波从柱顶注入,
打开凝胶柱,待其全部流入柱床后,加入PBS缓冲液。
此时,可以形成两条带: a,快速移动带,也就是FITC-蛋白标记物,先被洗脱,通常于室内光下可看到; b,慢速移动带,也就是未结合蛋白的FITC和二=甲苯青。仅仅在PBS缓冲液清洗后被洗脱出来。
8 )于4°C避光储存上述偶联物,加入0.1% ( w/v )叠氮化钠作为-种防腐剂。若蛋白浓度较低( < 1mg/ml) , 可加入1%BSA作为-种蛋白稳定剂。
9)标记物中荧光素和蛋白的比值( F/P )可通过测定495nm和280nm处的吸光值来鉴定, F/P应位于0.3-1.0。小于该比例则信号太低,高于该比例则背景太高。
相关定制产品:
FITC荧光标记钥孔傶血兰蛋白 Keyhole Limpet Hemocyanin(KLH)
FITC荧光标记肌钙蛋白I
FITC荧光标记C-反应蛋白
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FITC荧光标记触珠蛋白
FITC荧光标记纤维蛋白
FITC荧光标记蛋白酶K Proteinase K
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物科技有限公司