Cy3标记球蛋白（Cy3-labeled Globulin）

一、概述
球蛋白是一类重要的血浆蛋白，参与免疫、运输等多种生理功能。通过Cy3荧光染料标记后，常用于免疫成像、细胞摄取研究、靶向输运追踪等研究。

二、染料特性
Cy3是一种橙红色荧光染料，激发/发射波长约为550/570 nm，具有良好的光稳定性、溶解性和生物相容性，适用于共聚焦、流式细胞术和免疫荧光。

三、标记原理与方法
Cy3-NHS酯与球蛋白表面赖氨酸残基反应形成稳定共价键：

球蛋白在碱性缓冲液（如0.1 M NaHCO₃, pH 8.3）中溶解；

加入Cy3-NHS酯（DMSO预溶），室温避光反应1小时；

用Sephadex G-25柱或超滤去除游离染料；

计算标记效率（A280/A550）。

四、应用实例

体外免疫细胞摄取试验；

组织成像：例如检测球蛋白在肝、肾的分布；

结合亲和性研究：评估抗原抗体结合效率。

五、注意事项

反应前后必须避光；

过度标记会影响球蛋白活性，需控制摩尔比例（1:5或1:10）；

标记物需低温保存（–20℃以下，避光）。