细胞膜红色荧光染色试剂盒(DiI),Cell Plasma Membrane Staining Kit with DiI (Red Fluorescence)是一种以DiI为荧光探针,并提供了染色增强剂、能快速灵敏地对细胞膜进行红色荧光染色标记的试剂盒。
DiI即DiIC18(3),全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate,分子式为C59H97ClN2O4,分子量为933.88,CAS号为41085-99-8,是常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性羰花青(carbocyanine)染料,具有很长的亲脂性烃链,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色,染色后非常稳定。
DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考图1。其中,**激发波长为549nm,**发射波长为565nm。
DiI和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱。
DiI被广泛用于正向或逆向的、活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。DiI毒性很低,通常不会影响细胞的生存力(viability)。被DiI标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周,在体内可以长达一年。DiI在经过固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6mm/day,在活的神经元细胞膜上的迁移速率为6mm/day。
本试剂盒提供了染色增强剂,使细胞膜染色更加快速,荧光染色更加明亮,染色背景更低。
本试剂盒除了简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
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