MACS磁珠分选基本原理

用MACS磁珠标记细胞；

其次，将样品加入到安置在分离器上的MACS分选柱，已标记的细胞留在柱内，未标记的细胞先行流出；

较后，从分选器中移出分选柱，洗脱已标记的细胞。

2. MACS磁珠技术包含的三大独特组成

① MACS MicroBeads (磁珠)

② MACS Columns (分选柱)

③ MACS Separators (分选器)

其中，**的MACS磁珠位于绝对领先地位。磁珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒。

小磁珠（50 nm）：交联程度低——不会引起细胞活化、无需去除磁珠即可继续下游实验、无毒性、可以生物降解、不会沉降、临床细胞**中**可以使用的磁珠。

另外，就是MACS分选柱，可将磁场扩大10,000倍，从而实现分选细胞的高纯度以及高回收率。MACS分选柱填充有不同规格的铁珠，铁珠表面有亲水包被，不损伤细胞。可用于分选多种细胞及亚细胞物质、细菌、病毒、mRNA和蛋白质。不同规格的分选柱如下图所示：

较后，就是MACS分选器：选择合适的分选器也是实现细胞分选重要的一步。不同型号的分选柱有适配的分选器。

MACS微珠的分类

MACS磁珠分选策略

1. 阳性分选策略

优点：① 高纯度，尤其是富集稀有的细胞

      ② 高回收率

      ③ 操作简便、迅速

2. 去除分选策略

去除分选策略适用范围：

去除不需要的细胞。

缺乏针对目的细胞的特异性抗体（如**细胞）。

需进一步通过阳性选择分选细胞亚群。

3. 多重分选策略

（a）先去除分选后再阳性分选：

即先去除非目的细胞，再进行阳性分选。

适用范围：

非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原。

要分选非常稀有细胞，先去除非目的细胞再行阳性分选，可获得高纯度的目的细胞。

（b）多选微珠再阳选：

MACS多重分选是一种根据多种表面标志磁性分选细胞的技术。

    分选流程：先用MACS多选微珠标记目的细胞，进行一次参数阳性分选。然后细胞与多选解离试剂共同孵育，后者可以将微珠从抗体上酶性解离下来。接着使用针对另一细胞表面标志的抗体-微珠复合物磁性标记阳性分选细胞。二次标记的细胞可以再次进行阳性分选或者去除分选。

较后，通过简洁的MACS磁珠分选即获得高纯度、高回收率的目的细胞。