免疫磁珠细胞分选即磁珠分选技术常见问题

磁珠分选，也被称为免疫磁珠细胞分选，包括使用针对特定细胞表面抗原的抗体标记细胞进行选择或去除。被标记的细胞与磁珠交联，一旦被置于磁场中，即可被吸附。

由于其快速性和简便性，磁珠分选是科学家分离高纯度的特定细胞亚群较常用的方法之一。

关于磁珠细胞分选的常见问题

1. 应该使用磁珠分选还是流式分选？

磁珠分选和流式分选（FACS）是较常用的两种分离特定细胞群的方法。两种方法的选择取决于您将进行何种下游应用。

相对于复杂的流式分选，磁珠分选：

简单、快捷，较快8分钟就可以完成分选，获得目的细胞

无需昂贵精密的仪器，在生物安全柜即可做到无菌分选

没有高压液流和激光对细胞的损伤，分选的细胞活性更高

无需**人员操作，无需预约排队，可自主安排时间

当然，磁珠分选和流式分选也可结合使用。在进行流式分选前，使用磁珠分选技术预富集您的样本，能缩短细胞分选的时间、提高细胞活性，特别是在样本量较大或需要分选稀少的细胞类型时。

2. 应该选择有柱式还是无柱式的磁珠分选方法？

免疫磁珠分选有两种方式：有柱式分选和无柱式分选。

所谓有柱式磁珠分选，即被磁珠标记的细胞需要流经一个置于磁场内的分离柱从而实现对目的细胞分离的过程。这个分离柱内由一些微小铁珠构成，当这些铁珠被置于磁场中时会被磁化，从而产生一个可吸附被磁珠标记的细胞的局部磁场。当使用正选时（图1），未被磁珠标记的非目的细胞可以通过分离柱，而被磁珠标记的目的细胞则保留在分离柱中。当将分离柱移出磁场后，可通过缓冲液洗脱得到目的细胞。

然而在有柱式磁珠分选流程中，需要多次的洗涤细胞以避免分离过程中的交叉污染，并且每次分选时都需要更换新的分离柱，因此这种分选方法使得实验成本更高，实验流程更复杂，且费时费力。此外，因为堵柱子而损失珍贵样本的情况在有柱式磁珠分选的过程中非常见，特别是当使用的组织样本含有大量的细胞碎片时。

图1. 有柱式磁珠分选的正选操作流程

所谓无柱式磁珠分选，即直接将被磁珠标记的样本置于磁场内从而实现对目的细胞分离的过程。被磁珠标记的细胞由于磁场的作用被吸附在试管壁上。而未被标记的细胞则可通过倾倒出或移液器吸出。将试管移出磁场后，被标记的细胞则会从试管壁上脱离，悬浮于试管内。当使用正选时（图2），被标记的目的细胞被留在试管内，可立即用于下游应用。

图2. 无柱式磁珠细胞分选的正选操作流程

3. 应该选择正选还是负选？

磁珠分选又分为正选和负选（图3）。在选择磁珠分选方法前，我们先来了解什么是正选，什么是负选。

免疫磁珠阳性分选，也被称为正选，是指使用抗体偶联磁珠来标记目的细胞以达到将其收集的目的。样本在磁极中孵育后，由于抗体与磁珠相连使得被标记的细胞保留在试管中。正选具有以下特点：

分离的细胞纯度高

分离的细胞通常与抗体和磁珠相连

抗体混合物可与目的细胞表面特定的标记相连

可从负选后的细胞中分离其他细胞群

免疫磁珠阴性分选，也被称为负选，是指使用抗体偶联磁珠来标记非目的细胞以达到将其去除的目的。样本在磁极中孵育后，由于抗体与磁珠相连使得被标记的非目的细胞保留在试管中，而目的细胞则可通过倾倒或移液器吸出来收集。目的细胞没有结合特异性抗体，因此无法被磁珠标记。负选具有以下特点：

目的细胞未被磁珠标记

较小化样本处理步骤从而使得操作流程更快更简单

抗体混合物只结合所有非目的细胞

图3. 无柱式磁珠细胞分选中负选与正选的操作流程

选择正选或负选进行细胞分选实验取决于您的下游应用。对于大部分的下游应用，正选中被标记了抗体和EasySep™磁珠的细胞并不会影响下游实验。更不会激活细胞。

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免疫检测磁珠及配套试剂    羧基磁珠    

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GST标签蛋白纯化磁珠（GSH磁珠）    

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StrepTactin磁珠（纯化Strep tag II标签蛋白）    

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