蛋白酶

蛋白酶是蛋白水解酶的简称,是一类肽链内切酶，只能切开肽链内部的键,而不能切开肽链末端的键,因此也叫做内肽酶。常用的蛋白酶主要有胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)、嗜热菌蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、葡萄球菌蛋白酶和梭菌蛋白酶等。不同的蛋白酶作用于肽链的位点不同。

1.胰蛋白酶这是常用的蛋白水解酶,专一性强,只断裂赖氨酸或精氨酸残基的羧基端参与形成的肽键。因此,用它断裂多肽链得到的是以赖氨酸和精氨酸为C-末端残基的肽段。

2.胰凝乳蛋白酶此酶的专一性不如胰蛋白酶,它断裂苯丙氨酸﹑酪氨酸和色氨酸等疏水氨基酸残基的羧基端肽键。

3.胃蛋白酶它的专一性与胰凝乳蛋白酶类似,但它要求断裂点两侧的残基都是疏水性氨基酸,如苯丙氨酸-苯丙氨酸。此外,胃蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的适宜pH不同,前者是pH2;后者是pH8~9。

4.木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶的专-性差,断裂位点与其附近的序列关系密切,它对精氨酸和赖氨酸残基的羧基端肽键敏感。

5.葡萄球菌蛋白酶葡萄球菌蛋白酶亦称谷氨酸蛋白酶,是从金黄色葡萄球菌菌株Vs中分离得到的。当在磷酸缓冲液( pH7.8)中进行裂解时,它能在谷氨酸残基和天冬氨酸残基的羧基端断裂肽键。如果改用碳酸氢铵缓冲液( pH7.8)或醋酸缓冲液( pH4.0)时,则只能断裂谷氨酸残基羧基端的肽键。

6.梭菌蛋白酶梭菌蛋白酶亦称为精氨酸蛋白酶，是从梭状芽孢杆菌中分离出来的。该酶专门裂解精氨酸残基的羧基端肽键。

肽酶

能够水解蛋白质的酶除了上述蛋白水解酶以外，还有一类叫做肽酶的水解酶,这是一类肽链外切酶,或叫做外肽酶。外肽酶分为两类:一类是从肽链的N 一末端逐个地切下氨基酸,叫做氨肽酶;另一类是专一地从肽链的C-末端开始逐个降解,释放出游离氨基酸，叫做羧肽酶。由此可见,肽酶的作用是将蛋白质的肽链彻底水解为氨基酸。

1.氨肽酶﹐常用的氨肽酶是亮氨酸氨肽酶,亮氨酸氨肽酶不是只能水解以亮氨酸为N-末端残基的肽键,只是水解以亮氨酸为N-末端的肽键速度大。此外,还有焦谷氨酸氨肽酶等。

2.羧肽酶惇目前常用的有四种羧肽酶:A、B、C和Y。其中A和B分别来自牛胰和猪胰;C得自柑橘叶;Y取自面包酵母。研究多、使用广泛的是羧肽酶A和B。羧肽酶A能释放除脯氨酸﹑精氨酸和赖氨酸之外的所有C–末端残基,而羧肽酶B只水解以碱性氨基酸精氨酸和赖氨酸为C-末端残基的肽键。羧肽酶A和B的混合物能释故除脯氨酸之外的任一C-末端残基。羧肽酶￥可以作用于任何一个C–末端残基。

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