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Human CRISPRa (SAM) Library,定制服务
发布时间:2024-10-18     作者:axc   分享到:

Human CRISPRa (SAM) Library,定制服务

Human CRISPRa (SAM) Library 是一种专门针对人类基因组设计的 CRISPR 激活文库,它利用了 CRISPR - Cas 系统和协同激活介质(synergistic activation mediator,SAM)技术,为研究人类基因功能和疾病机制提供了强大的工具。

一、SAM 技术原理

SAM 系统由失活的 Cas9(dCas9)、转录激活因子(如 VP64)和两个向导 RNA(gRNA)组成。其中,一个 gRNA 靶向基因的启动子区域,另一个 gRNA 靶向特定的转录激活因子结合位点。当这两个 gRNA 同时与 dCas9 结合并引导其到目标位置时,转录激活因子可以有效地激活基因的转录。

与传统的 CRISPRa 技术相比,SAM 技术具有更高的激活效率和特异性。它可以通过精确设计 gRNA 序列,实现对特定基因的高效激活,同时减少对非靶向基因的影响。

二、Human CRISPRa (SAM) Library 构建

人类基因组靶点选择

首先,需要根据人类基因组序列选择合适的基因靶点。这些靶点可以包括已知的与疾病相关的基因、基因家族、信号通路中的关键基因等。通过对大量基因的筛选和分析,确定具有研究价值的靶点。

gRNA 设计与合成

针对选定的基因靶点,设计并合成相应的 gRNA 序列。gRNA 的设计需要考虑多个因素,如靶点的特异性、结合效率、脱靶效应等。同时,为了提高文库的多样性和覆盖度,需要设计大量不同的 gRNA 序列。

文库载体构建

将合成的 gRNA 序列克隆到合适的载体中,形成 Human CRISPRa (SAM) Library。载体通常包含启动子、终止子、筛选标记等元件,以确保 gRNA 的正确表达和细胞筛选。

文库质量检测与优化

构建好的文库需要进行严格的质量检测,包括 gRNA 序列的准确性、文库的多样性、覆盖率等方面。通过高通量测序等技术对文库进行分析,发现并纠正可能存在的问题。同时,还可以对文库进行优化,如调整 gRNA 浓度、优化载体结构等,以提高文库的性能。

Human CRISPRa (SAM) Library

产品:

shRNA打靶效率检测载体 慢病毒载体(表达shRNA和含有打靶位点的报告基因)

哺乳动物CRISPR基因编辑载体

gRNA和Cas9共表达载体  质粒载体

gRNA和Cas9共表达载体 慢病毒载体

gRNA和Cas9共表达载体 腺病毒载体

gRNA和Cas9共表达载体 AAV病毒载体(表达单SagRNA)

gRNA和Cas9共表达载体 PiggyBac转座载体

哺乳动物CRISPR基因表达调控载体


西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:

(1)过表达质粒构建;

(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)

(3)构建基因截短体质粒;

(4)亚克隆质粒构建;

(5)通过慢病毒介导的基因过表达;

(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除


注意事项:

本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。


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