Mouse CRISPRa (SAM) Library,技术服务
Mouse CRISPRa (SAM) Library 是专门为小鼠基因组设计的 CRISPR 激活文库,它结合了 CRISPR - Cas 系统和协同激活介质(SAM)技术,为研究小鼠基因功能和生物学过程提供了强大的工具。
一、技术背景
小鼠作为一种重要的模式生物,在生物学、医学和药学等领域有着广泛的应用。了解小鼠基因的功能对于揭示生命现象的基本规律。CRISPRa 技术的出现为基因功能研究提供了一种高效的方法,而 Mouse CRISPRa (SAM) Library 则进一步拓展了这一技术在小鼠研究中的应用。
二、文库构建
靶点选择
根据小鼠基因组序列和已知的生物学信息,选择感兴趣的基因作为靶点。这些基因可以涵盖各种生物学过程,如发育、免疫、代谢等。同时,还可以考虑选择一些在疾病模型中起关键作用的基因。
gRNA 设计与合成
针对选定的基因靶点,设计特异性的 gRNA 序列。这些 gRNA 序列需要经过精心优化,以确保其能够有效地引导 dCas9 - 转录激活因子复合物结合到目标基因的启动子区域。通过化学合成或体外转录等方法合成这些 gRNA 序列。
文库载体构建
将合成的 gRNA 序列克隆到合适的载体中,构建成 Mouse CRISPRa (SAM) Library。载体通常包含启动子、终止子、筛选标记等元件,以保证 gRNA 在小鼠细胞中的正确表达和筛选。
质量控制与优化
对构建好的文库进行质量检测,包括 gRNA 序列的准确性、文库的多样性和覆盖率等方面。通过高通量测序等技术对文库进行分析,确保文库能够有效地覆盖目标基因。同时,根据检测结果对文库进行优化,提高其性能和可靠性。
齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
产品:
哺乳动物嵌合抗原受体(CAR)表达载体
哺乳动物抗体轻链表达载体 PiggyBac转座载体
哺乳动物抗体表达载体 PiggyBac转座载体
哺乳动物抗体表达载体 Tol2转座载体
shRNA打靶效率检测载体
shRNA打靶效率检测载体 慢病毒载体(表达含打靶位点的报告基因)
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。